«Аминокислоты и белки» 1. Определение и классификация аминокислот 2. Изомерия, номенклатура аминокислот 3. Способы получения аминокислот 4. Физические и химические свойства 5. Качественные реакции на аминокислоты 6. Понятие, классификация и биологические функции белков 7.Строение белка 8. Свойства белков 1. Определение и классификация аминокислот Аминокислоты - это органические бифункциональные соединения, в состав которых входят карбоксильная группа -СООН и аминогруппа -NН2. Аминокислоты классифицируют по структурным признакам. 1. В зависимости от взаимного расположения амино- и карбоксильной групп аминокислоты подразделяют на α-, β-, γ-, δ-, ε- и т. д. 2. В зависимости от количества функциональных групп различают кислые, нейтральные и основные: кислые: 2. В зависимости от количества функциональных групп различают кислые, нейтральные и основные: нейтральные: основные: основные лизин 3. По характеру углеводородного радикала различают алифатические (жирные), ароматические, серосодержащие и гетероциклические аминокислоты. Приведенные выше аминокислоты относятся к жирному ряду. Примером ароматической аминокислоты может служить парааминобензойная кислота: Примером гетероциклической аминокислоты может служить триптофан – незаменимая α- аминокислота: Метионин Цистеин Аминокислоты , синтезируемые в организме из кетокислот и оксикислот, называются заменимыми. Соответственно, аминокислоты, которые организм не способен синтезировать, называются незаменимыми. Незаменимые аминокислоты организм должен получать с пищей. Для разных животных и человека набор незаменимых аминокислот неодинаков, он определяется видовой принадлежностью организма, его возрастом и другими факторами. Корма животных, не содержащие хотя бы одну незаменимую аминокислоту, считаются неполноценными. ПРИМЕНЕНИЕ 1) аминокислоты широко распространены в природе; 2) молекулы аминокислот – это те кирпичики, из которых построены все растительные и животные белки; аминокислоты, необходимые для построения белков организма, человек и животные получают в составе белков пищи; 3) аминокислоты прописываются при сильном истощении, после тяжелых операций; 4) их используют для питания больных; 5) аминокислоты необходимы в качестве лечебного средства при некоторых болезнях (например, глутаминовая кислота используется при нервных заболеваниях, гистидин – при язве желудка); 6) некоторые аминокислоты применяются в сельском хозяйстве для подкормки животных, что положительно влияет на их рост; 7) имеют техническое значение: аминокапроновая и аминоэнантовая кислоты образуют синтетические волокна – капрон и энант. 2. Изомерия, номенклатура аминокислот По систематической номенклатуре названия аминокислот образуются из названий соответствующих кислот прибавлением приставки амино- и указанием места расположения аминогруппы по отношению к карбоксильной группе. Нумерация углеродной цепи с атома углерода карбоксильной группы. Часто используется также другой способ построения названий аминокислот, согласно которому к тривиальному названию карбоновой кислоты добавляется приставка амино- с указанием положения аминогруппы буквой греческого алфавита. Пример: Для α-аминокислот R-CH(NH2)COOH, которые играют исключительно важную роль в процессах жизнедеятельности животных и растений, применяются тривиальные названия. Таблица 1- Некоторые важнейшие α-аминокислоты Аминокислота Сокращённое Строение радикала ( R ) обозначение Глицин Gly (Гли) H- Аланин Ala (Ала) CH3 - Валин Val (Вал) (CH3)2CH - Лейцин Leu (Лей) (CH3)2CH – CH2 - Серин Ser (Сер) OH- CH2 - Тирозин Tyr (Тир) HO – C6H4 – CH2 - Аспарагиновая кислота Asp (Асп) HOOC – CH2 - Глутаминовая кислота Glu (Глу) HOOC – CH2 – CH2 - Цистеин Cys (Цис) HS – CH2 - Аспарагин Asn (Асн) O = C – CH2 – │ NH2 Лизин Lys (Лиз) NH2 – CH2- CH2 – CH2 - Фенилаланин Phen (Фен) C6H5 – CH2 - Если в молекуле аминокислоты содержится две аминогруппы, то в ее названии используется приставка диамино-, три группы NH2 – триамино- и т.д. например: Наличие двух или трех карбоксильных групп отражается в названии суффиксом –диовая или -триовая кислота: Виды изомерии 1. Изомерия углеродного скелета 2. Изомерия положения функциональных групп 3. Оптическая изомерия Оптическую изомерию имеют все α-аминокислоты, кроме глицина NН2-CH2-COOH. 3. Способы получения аминокислот 3. Циангидринный метод: Важной реакцией получения α-аминокислот является действие аммиака на циангидрины альдегидов и кетонов: с последующим омылением аминонитрила в аминокислоту: Аминонитрилы можно получить также, действуя на альдегиды или кетоны непосредственно цианистым аммонием. Эта реакция приобрела особое значение после того, как Н. Д. Зелинский с сотрудниками показали, что синильную кислоту и аммиак или цианистый аммоний можно заменить смесью водных растворов хлористого аммония и цианистого калия, в результате обменного разложения дающих цианистый аммоний, который и вступает в реакцию с альдегидами или кетонами: 4. Восстановление нитрозамещенных карбоновых кислот: 5. Микробиологический синтез: Известны микроорганизмы, которые в процессе жизнедеятельности продуцируют α - аминокислоты белков. 4. Физические и химические свойства Физические свойства: Аминокислоты представляют собой кристаллические вещества с высокими (выше 250°С) температурами плавления, которые мало отличаются у индивидуальных аминокислот и поэтому нехарактерны. Плавление сопровождается разложением вещества. Аминокислоты хорошо растворимы в воде и нерастворимы в органических растворителях, чем они похожи на неорганические соединения. Многие аминокислоты обладают сладким вкусом. Химические свойства: Аминокислоты амфотерные органические соединения, для них характерны кислотноосновные свойства. I. Общие свойства 1. Внутримолекулярная нейтрализация → образуется биполярный цвиттер-ион: Водные растворы электропроводны. Эти свойства объясняются тем, что молекулы аминокислот существуют в виде внутренних солей, которые образуются за счет переноса протона от карбоксила к аминогруппе: цвиттер-ион Водные растворы аминокислот имеют нейтральную, кислую или щелочную среду в зависимости от количества функциональных групп. 2. Поликонденсация → образуются полипептиды (белки): При взаимодействии двух α-аминокислот образуется дипептид. 3. Декарбоксилирование: NH2-CH2-COOH декарбоксилаза → NH2-CH3 + CO2↑ 4. Дезаминирование: в организме идет под действием фермента гидрогеназа 5. Переаминирование: аминотрансфераза II. Свойства карбоксильной группы (кислотность) 1. С основаниями: NH2-CH2-COOH + NaOH → NH2-CH2-COONa + H2O натриевая соль 2-аминоуксусной кислоты 2. Со спиртами (реакция этерификации): NH2-CH2-COOH + CH3OH HCl(газ) → NH2-CH2-COOCH3 + H2O метиловый эфир 2- аминоуксусной кислоты 3. С аммиаком с образованием амидов: NH2-CH(R)-COOH + H-NH2 → NH2-CH(R)-CONH2 + H2O 4. Поведение аминокислот при нагревании: а) α-аминокислоты при нагревании подвергаются межмолекулярной дегидратации с образованием циклических амидов – дикетопиперазинов: б) при нагревании β-аминокислот от них отщепляется аммиак с образованием α, β-непредельных кислот с сопряженной системой двойных связей: в) нагревание γ-, δ-, ε- и т.д. аминокислот сопровождается внутримолекулярной дегидратацией и образованием внутренних циклических амидов – лактамов: Практическое значение имеет внутримолекулярное взаимодействие функциональных групп ε-аминокапроновой кислоты, в результате которого образуется ε-капролактам (полупродукт для получения капрона): III. Свойства аминогруппы (основность) 1. С сильными кислотами → соли: HOOC-CH2-NH2 + HCl → [HOOC-CH2-NH3]Cl или HOOC-CH2NH2·HCl 2. С азотистой кислотой (подобно первичным аминам): NH2-CH(R)-COOH + HNO2 → HO-CH(R)-COOH + N2↑+ H2O гидроксокислота Измерение объёма выделившегося азота позволяет определить количество аминокислоты (метод Ван-Слайка) 5. Качественные реакции 1. Все аминокислоты окисляются нингидрином с образованием продуктов сине-фиолетового цвета! 2. С ионами тяжелых металлов α-аминокислоты образуют внутрикомплексные соли. Комплексы меди (II), имеющие глубокую синюю окраску, используются для обнаружения α-аминокислот. 2. С ионами тяжелых металлов α-аминокислоты образуют внутрикомплексные соли. Комплексы меди (II), имеющие глубокую синюю окраску, используются для обнаружения αаминокислот. 2. С ионами тяжелых металлов αаминокислоты образуют внутрикомплексные 2. Ксантопротеиновая реакция: ароматические кислоты подвергаются нитрованию концентрированной азотной кислотой с образованием комплекса желтого соли. Комплексы меди (II), имеющие глубокую цвета: синюю окраску, используются для обнаружения α-аминокислот. 6. Понятие, классификация и биологические функции белков Белки — высокомолекулярные органические соединения, состоящие из остатков α-аминокислот. В зависимости от того, могут ли аминокислоты синтезироваться в организме человека и других животных, различают: заменимые аминокислоты — могут синтезироваться; незаменимые аминокислоты — не могут синтезироваться. Незаменимые аминокислоты должны поступать в организм вместе с пищей. Растения синтезируют все виды аминокислот. В зависимости от аминокислотного состава, белки бывают: полноценными — содержат весь набор аминокислот; неполноценными — какие-то аминокислоты в их составе отсутствуют. Если белки состоят только из аминокислот, их называют простыми. Если белки содержат помимо аминокислот еще и неаминокислотный компонент (простетическую группу), их называют сложными - протеидами. Простетическая группа может быть представлена металлами (хромопротеиды), углеводами (гликопротеиды), липидами (липопротеиды), нуклеиновыми кислотами (нуклеопротеиды). По растворимости протеины делятся на: 1) альбумины – водорастворимые белки преимущественно животного происхождения. К ним относятся альбумины сыворотки крови, лактальбумин молока, овальбумин яичного белка, миоальбумин мышц животных, а также лейкозин пшеницы, ржи и ячменя, легуменин гречихи и сои, рицин касторовых бобов. Характерным свойством альбуминов является их высокая адсорбционная способность. Альбумины связывают токсичные соединения – алкалоиды, тяжелые металлы, билирубин. Благодаря высокой гидрофильности альбумины играют важную роль в поддержании осмотического давления крови (80% осмотическое давление крови от всех других сывороточных белков). Альбумины выполняют в организме питательную, транспортную, обезвреживающую функции; 2) глобулины – не растворимы в воде, но растворимы в слабых растворах солей. В горохе содержится белок легумин, в сое – глиципин, в семенах фасоли - фазеолин, в картофеле - туберин, в крови - фибриноген, в молоке - лактоглобулин, в яйцах - яичный глобулин, в конопле – эдестин. Глобулины в организме выполняют питательную, защитную, транспортную функции; 3) протамины – хорошо растворяются в воде, кислой среде, но осаждаются в щелочной среде. Выполняют главным образом структурную функцию, поэтому и присутствуют в клетках не способных к делению; 4) проламины – спирторастворимые белки. К ним относятся глиадин (белок пшеницы, ржи), гордеин (белок ячменя), зеин (белок кукурузы), авенин (белокян овса), эдестин (белок конопли). Проламины практически отсутствуют в бобовых и масличных культурах; 5) гистоны – растворимы в воде и разбавленных кислотах, нерастворимы в водном аммиаке и не свертываются при нагревании, содержатся в ядрах клеток высших организмов в соединении с нуклеиновыми кислотами, образуя нуклеопротеиды, играют важную роль в регуляции генной активности; 6) глютелины – растворяются в разбавленных кислотах и щелочах, не растворяются в воде, спирте и разбавленных солевых растворах. Это белки растительного происхождения, имеющие высокую питательную ценность. Они присутствуют в семенах злаковых культур вместе с проламинами. 7) протеиноиды – белки опорных тканей (костей, хрящей, сухожилий, связок). Они представлены коллагеном, эластином и кератином, не растворяются в воде, солевых растворах, разведенных кислотах и щелочах. Не перевариваются в желудочно-кишечном тракте большинства животных и человека и поэтому не могут выполнять питательную Ссылка на фильм https://himija-online.ru/organicheskayaximiya/belki/funkcii-belkov-v-organizme.html 1. Каталитическая (ферментативная) функция Абсолютно все биохимические процессы в организме протекают в присутствии катализаторов – ферментов. Они ускоряют реакции в миллионы раз, причем для каждой реакции существует свой фермент. В настоящее время известно свыше 2000 различных ферментов, которые являются биологическими катализаторами. Например, фермент пепсин расщепляет белки в процессе пищеварения. 2. Транспортная функция Некоторые белки способны присоединять и переносить (транспортировать) различные вещества по крови от одного органа к другому и в пределах клетки. Белки транспортируют липиды (липопротеиды), углеводы (гликопротеиды), ионы металлов (глобулины), кислород и углекислый газ (гемоглобин), некоторые витамины, гормоны и др. Например, альбумины крови транспортируют липиды и высшие жирные кислоты (ВЖК), лекарственные вещества, билирубин. Белок эритроцитов крови гемоглобин соединяется в легких с кислородом, превращаясь в оксигемоглобин. Достигая с током крови органов и тканей, оксигемоглобин расщепляется и отдает кислород, необходимый для обеспечения окислительных процессов в тканях. 3. Защитная функция Защитную функцию выполняют специфические белки (антитела — иммуноглобулины), которые вырабатываются иммунной системой организма. Они обеспечивают физическую, химическую и иммунную защиту организма путем связывания и обезвреживания веществ, поступающих в организм или появляющихся в результате жизнедеятельности бактерий и вирусов. Например, белок плазмы крови фибриноген участвует в свертывании крови (образовывает сгусток). Это защищает организм от потери крови при ранениях. Альбумины обезвреживают ядовитые вещества (ВЖК и билирубин) в крови. Антитела, вырабатываемые лимфоцитами, блокируют чужеродные белки. Интерфероны — универсальные противовирусные белки. 4. Сократительная (двигательная) функция Важным признаком жизни является подвижность, в основе которой лежит данная функция белков, таких как актин и миозин – белки мышц. Кроме мышечных сокращений к этой функции относят изменение форм клеток и субклеточных частиц. B результате взаимодействия белков происходит передвижение в пространстве, сокращение и расслабление сердца, движение других внутренних органов. 5. Структурная функция Белки играют большую роль в формировании всех клеточных структур. Из них построены опорные, мышечные, покровные ткани. Некоторые из них (коллаген соединительной ткани, кератин волос, ногтей, эластин стенок кровеносных сосудов, фиброин шелка и др.) выполняют почти исключительно структурную функцию. Кератин синтезируется кожей. Волосы и ногти – это производные кожи. В комплексе с липидами белки участвуют в построении мембран клеток и внутриклеточных образований. 6. Гормональная (регуляторная) функция Регуляторная функция присуща белкам-гормонам, которые регулируют различные физиологические процессы. Например, инсулин регулирует содержание глюкозы в крови. При недостатке инсулина в организме возникает заболевание, известное как сахарный диабет. Интересно знать! В плазме некоторых антарктических рыб содержатся белки со свойствами антифриза, предохраняющие рыб от замерзания, а у ряда насекомых в местах прикрепления крыльев находится белок резилин, обладающий почти идеальной эластичностью. В одном из африканских растений синтезируется белок монеллин с очень сладким вкусом. 7. Питательная (запасная) функция осуществляется резервными белками, которые запасаются в качестве источника энергии и вещества. Например: казеин, яичный альбумин, белки яйца обеспечивают рост и развитие плода, а белки молока служат источником питания для новорожденного. 8. Рецепторная (сигнальная) функция Некоторые белки (белки-рецепторы), встроенные в клеточную мембрану, способны изменять свою структуру под воздействием внешней среды. Так происходит прием сигналов извне и передача информации в клетку. Например, действие света на сетчатку глаза воспринимается фоторецептором родопсином. Рецепторы, активизируемые низкомолекулярными веществами типа ацетилхолина, передают нервные импульсы в местах соединения нервных клеток. 9. Энергетическая функция Белки могут выполнять энергетическую функцию, являясь одним из источников энергии в клетке (после их гидролиза). Обычно белки расходуются на энергетические нужды в крайних случаях, когда исчерпаны запасы углеводов и жиров. 7.Строение белка Белки имеют 4 основных структуры: первичную, вторичную, третичную, четвертичную: 1. Под первичной структурой понимают последовательность аминокислотных остатков в полипептидной цепи. Она уникальна для любого белка и определяет его форму, свойства и функции. Значительное совпадение первичной структуры характерно для белков, выполняющих сходные функции. Замена всего лишь одной аминокислоты в одной из цепей может изменить функцию молекулы белка. Например, замена глутаминовой кислоты на валин приводит к образованию аномального гемоглобина и к заболеванию, которое называется серповидноклеточная анемия: Симптомы: потеря трудоспособности, постоянная отдышка, учащенное сердцебиение, пониженный иммунитет. Одним из признаков серповидноклеточной анемии является желтизна кожных покровов. 2. Вторичная структура – упорядоченное свертывание полипептидной цепи в спираль (имеет вид растянутой пружины). Витки спирали укрепляются водородными связями, возникающими между карбоксильными группами и аминогруппами. Практически все СОи NН-группы принимают участие в образовании водородных связей. 3. Третичная структура – укладка полипептидных цепей в глобулы, возникающая в результате возникновения химических связей (водородных, ионных, дисульфидных) и установления гидрофобных взаимодействий между радикалами аминокислотных остатков. 4. Четвертичная структура характерна для сложных белков, молекулы которых образованы двумя и более глобулами. Утрата белковой молекулой своей природной структуры называется денатурацией. Она может возникнуть при воздействии температуры, химических веществ, при нагревании и облучении. Если при денатурации не нарушены первичные структуры, то при восстановлении нормальных условий белок способен воссоздать свою структуру. Этот процесс носит название ренатурация. Следовательно, все особенности строения белка определяются первичной структурой! 8. Свойства белков 1. Амфотерные свойства белков Как и аминокислоты, белки являются амфотерными соединениями, так как молекула любого белка содержит на одном конце группу -NH2, а на другом конце – группу -СООН. Так, при действии щелочей белок реагирует в форме аниона – соединяется с катионом щелочи: При действии же кислот он выступает в форме катиона: Если в молекуле белка преобладают карбоксильные группы, то он проявляет свойства кислот, если же преобладают аминогруппы, — свойства оснований. Очень важным для жизнедеятельности живых организмов является буферное свойство белков, т.е. способность связывать как кислоты, так и основания, и поддерживать постоянное значение рН различных систем живого организма. 2. Денатурация белка (необратимое осаждение, свертывание) Денатурация – это разрушение вторичной и третичной структуры белка (полное или частичное) и изменение его природных свойств с сохранением первичной структуры белка. Сущность денатурации белка сводится к разрушению связей, обусловливающих вторичную и третичную структуры молекулы (водородных, солевых и других мостиков). А это приводит к дезориентации конфигурации белковой молекулы. Денатурация бывает обратимой и необратимой. Обратимая денатурация белка происходит при употреблении алкоголя, солёной пищи. Необратимая денатурация может быть вызвана при действии таких реагентов, как концентрированные кислоты и щелочи, спирты, в результате воздействия высокой температуры, радиации, при отравлении организма солями тяжелых металлов (Hg2+, Pb2+, Си2+). Например, яичный белок альбумин осаждается из раствора (свертывается) при варке яиц (при температуре 60-700С), теряя способность растворяться в воде. https://himija-online.ru/videoopyty-2/svertyvanie-belkov-pri-nagrevanii.html Ссылки на видео по денатурации: https://himija-online.ru/videoopyty-2/osazhdenie-belkov-solyami-tyazhelyx-metallov.html https://himija-online.ru/videoopyty-2/osazhdenie-belkov-spirtom.html 3. Гидролиз белков - это необратимое разрушение первичной структуры в кислом или щелочном растворе с образованием аминокислот. Анализируя продукты гидролиза, можно установить количественный состав белков. Переваривание белков в организме по своей сути представляет ферментативный гидролиз белковых молекул. В лабораторных условиях и в промышленности проводится кислотный гидролиз. В ходе гидролиза белков происходит разрушение пептидных связей. Гидролиз белка имеет ступенчатый характер: 4. Цветные (качественные) реакции на белки: а) Ксантопротеиновая реакция (на остатки аминокислот, содержащих бензольные кольца) Белки, содержащие остатки ароматических аминокислот (фенилаланина, тирозина), дают желтое окрашивание при действии концентрированной азотной кислоты. б) Биуретовая реакция (на пептидные связи) Все соединения, содержащие пептидную связь, дают фиолетовое окрашивание при действии на них солей меди (II) в щелочном растворе. Ссылка на видео опыт ы https://himija-online.ru/videoopyty-2/kachestvennye-reakcii-nabelki-biuretovaya-i-ksantoproteinovaya.html в) Цистеиновая реакция (на остатки аминокислот, содержащих серу) Причина появления окраски – образование черного осадка сульфида серебра (II) PbS. Ссылка на видеоопыт: https://himija-online.ru/videoopyty-2/kachestvennoe-opredelenie-azota-v-organicheskixsoedineniyax.html Лабораторная работа № 2 Цветные реакциии на белки и аминокислоты. Теоретическая часть. Значение цветных реакции состоит в том, что они дают возможность обнаружить присутствие белка в биологических жидкостях, растворах и установить аминокислотный состав различных природных белков. Эти реакции применяются как для качественного, так и для количественного определения белка и содержащихся в нём аминокислот. Существует два типа цветных реакций: 1) универсальные — биуретовая (на все белки) и нингидриновая (на все α-аминокислоты и белки); 2) специфические — только на определенные аминокислоты как в молекуле белка, так и в растворах отдельных аминокислот (реакция Фоля на аминокислоты, содержащие слабосвязанную серу, реакция Миллона на тирозин, реакция Сакагучи на аргинин и т.д.). При проведении цветных реакций на белки и аминокислоты необходимо предварительно составить следующую таблицу: № Название реакции Применяемые реактивы Появление окрашивания Что открывает данная реакция, её химизм Практическая часть. 1. Биуретовая реакция Принцип метода. Биуретовая реакция открывает пептидную связь в белке. В щелочной среде раствор белка при взаимодействии с ионами меди приобретает сине–фиолетовый цвет, а продукты неполного гидролиза его — пептоны — розовое окрашивание. Биуретовую реакцию способны давать вещества, которые содержат не менее двух пептидных связей. Биуретовая реакция схематично протекает так: Енольная форма полипептида, образованная в сильно щелочной среде, дает отрицательный заряд, и кислород, взаимодействуя с медью, образует ковалентную связь, а, взаимодействуя с атомами азота, медь образует координационные связи. Степень окраски биуретового комплекса зависит от концентрации белка и количества медной соли в растворе. Нельзя добавлять избыток сульфата меди, так как синий осадок гидрата окиси меди маскирует характерное фиолетовое окрашивание биуретового комплекса белка. Отдельные аминокислоты, такие как гистидин, серин, трионин, аспарагин дают положительную биуретовую реакцию при условии больших концентраций их в растворе. Примечание: биуретовая реакция получила свое название от производного мочевины — биурета. Биурет, имеющий группировку –CO-NHобразуется при нагревании мочевины с отщеплением от неё аммиака и дает то же окрашивание, что и белки. Строение биуретового комплекса: Образование биурета: Как можно видеть из приведенной выше формулы, биурет в щелочной среде претерпевает полную енолизацию по схеме: Реактивы: раствор яичного белка (1—2 белка куриных яиц отделяют от желтков, взбалтывают с 1 л воды); едкий натр 10% раствор; сернокислая медь 1% раствор. Ход работы: к 5 каплям раствора белка прибавляют 3 капли 10% раствора едкого натра и 1 каплю сернокислой меди, перемешивают; содержимое пробирки приобретает фиолетовый цвет. . Нингидриновая реакция. Принцип метода. Нингидриновая реакция характерна для аминокислот, чья аминогруппа находится в α-положении, а также белков и полипептидов. Аминокислоты, полипептиды, белки при кипячении с водным раствором нингидрина дают синее или сине-фиолетовое окрашивание. В результате взаимодействия α-аминокислоты с нингидрином образуется шиффово основание, которое перегруппировывается, декарбоксилируется и расщепляется на альдегид и аминодикетогидринден. Химизм реакции с водным раствором нингидрина следующий: Аминодикетогидринден конденсируется ещё с одной молекулой нингидрина. Образовавшееся соединение, енолизируясь, переходит в окрашенную форму, получившую название «синефиолетовый комплекс Руэмана», формула которого Реактивы: раствор яичного белка, нингидрин, 0,1 % раствор. Ход работы: к 5 каплям раствора белка приливают 5 капель раствора нингидрина, кипятят 1-2 минуты. Появляется синефиолетовое окрашивание. С течением времени раствор синеет. Примечание: нингидриновая реакция со спиртовым раствором нингидрина широко используется для разделения аминокислот хроматографическим методом, для открытия отдельных аминокислот и определения их количества. В присутствии органических растворителей образовавшееся шиффово основание не распадается, поскольку в соединении нет воды. Конденсируясь с нингидрином, оно содержит в своем составе радикал исходной аминокислоты, который обусловливает различную окраску: синюю, фиолетовую, а в присутствии пролина — желтую.
