ПАТОГЕНЫЕ КОККИ – ВОЗБУДИТЕЛИ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ Схема 1 ПАТОГЕННЫЕ КОККИ Грамположительные Грамотрицательные Семейство Micrococcaceae Семейство Streptococcaceae Семейство Neisseriaceae Род Staphylococcus Род Enterococcus Род Neisseria Род Micrococcus Род Streptococcus Род Moraxella Род Stomatococcus Род Leuconostoc Род Acinetobacter Род Aerococcus Род Kingella Род Lactococcus Род Pediococcus Таблица 1. Сравнительная характеристика патогенных кокков Признак 1 Форма Расположение в мазках относительно друг друга Образование капсулы 1 Семейство Micrococcaceae 2 шаровидная хаотично (стафилококки – в виде грозди) + (микрокапсула) 2 Семейство Streptococcaceae 3 эллипсовидная, пневмококки – в виде пламени свечи цепочки различной длины, попарно Семейство Neisseriaceae 4 бобовидная (в форме кофейных зерен) попарно + (пневмококкимакрокапсула) 3 + (микрокапсула) 4 Питательные среды для роста и размножения Температурные границы роста Тип дыхания Биохимическая активность Токсинообразование Патогенность Вызываемые заболевания Способность вызывать септические состояния Простые (присутствие соли и сахара) Кровяные и сывороточные среды Сложные среды, содержащие цельную кровь, сыворотку, асцитическую жидкость от 30 °С до 40 °С от 8 °С до 40 °С Факультативные анаэробы +++ ++ (наличие (менее активны, чем большого набора представители сахаролитических семейства и Micrococcaceae) протеолитических ферментов) Вырабатывают экзотоксины Аэробы + (не обладают протеолитической активностью) Выделяют эндотоксин Условно-патогенные Патогенные Неспецифические гнойно-воспалительные заболевания Специфические заболевания + + + Семейство MICROCOCCACEAE Род STAPHYLOCOCCUS Таблица 2. Морфо-функциональная характеристика представителей рода Staphylococcus Признак Форма Расположение по отношению друг к другу Размеры Окраска по Граму Тип дыхания Тип питания Наличие капсулы Наличие жгутиков Образование спор Характеристика Шаровидная Одиночно, короткими цепочками, гроздевидными скоплениями 0,5 - 1,5 мкм в диаметре Грамположительные Факультативные анаэробы Хемоорганотрофы со смешанным типом метаболизма Микрокапсула Неподвижны Не образуют Таблица 3. Культуральные свойства представителей рода Staphylococcus Признак 1 Питательные среды 1 Характеристика 2 Простые среды с 5-10% содержанием NaCl и глюкозы 2 Температурные границы роста на питательных средах Оптимальная рН среды Типы колоний: на плотных средах 18 - 40°С (оптимум 30 - 37°С) 6,2 – 8,4 Круглые (2 – 4 мм в диаметре), выпуклые, с ровными краями, непрозрачные, с матовой поверхностью, окрашенные в желтый, кремовый или оранжевый цвета Равномерное помутнение среды, выпадение рыхлого осадка на жидких средах Таблица 3. Биохимические свойства представителей рода Staphylococcus Признак St.aureus St.epidermidis St.saprophyticus Ферментация: глюкозы + (К) + (К) + (К) лактозы + (К) ± (К) ± (К) сахарозы + (К) + (К) + (К) мальтозы + (К) + (К) + (К) маннита + (К) ± (К) Восстановление нитратов + + (слабо) в нитриты Разжижение желатина + + + Образование H2S + + + Образование индола Лецитиназная активность + Образование каталазы + + + Образование + плазмокоагулазы Образование лецитиназы + Образование ДНК-азы + Гемолитическая + ± (слабо) активность Примечание: «+» - наличие признака; «-» - отсутствие признака; «±» - непостоянный признак; «+ (К)» - ферментация до кислоты без газа. Схема 2 Антигенные свойства представителей рода Staphylococcus Родовые антигены АНТИГЕНЫ Перекрестно-реагирующие антигены с изоантигенами эритроцитов, кожи и почек человека Видовые К-антигены (капсульные Типоспецифические О-соматические антигены Схема 3 Род Staphylococcus Коагулазоположительные стафилококки St. aureus3 St. intermedius2 St. hyicus Примечание: 1 – патогенные только для человека; 2 – патогенные только для животных; 3 – патогенные для человека и животных. Коагулазоотрицательные стафилококки St. saprophyticus1 St. hominis1 St. capitis St. epidermidis3 St. haemolyticus1 St. saccharolyticus (строгий анаэроб) Схема 4 Патогенность представителей рода Staphylococcus Ф А К Т О Р Ы П А Т О Г Е Н Н О С Т И Факторы адгезии Адгезины – поверхностные белки, поверхностные полисахариды Факторы инвазии Плазмокоагулаза, гиалуронидаза, фибринолизин, лецитиназа, фосфотаза, протеиназа, ДНК-аза, липаза, лизоцимоподобный фермент Факторы агрессии Капсула, компоненты клеточной стенки: тейхоевые кислоты, пептидогликан, белок А, каталаза, β-лактамаза Токсинообразование Мембранповреждающие токсины (гемолизины): α – токсин, β – токсин, γ – токсин, δ – токсин; эксфолиатины (А и В); токсин синдрома токсического шока (TSST – 1) (Toxic Shock Syndrome Toxic); лейкоцидин (токсин Пантона – Валентайна); энтеротоксины (А, В, С1-3, Д, Е) Схема 5 Эпидемиология заболеваний, вызываемых представителями рода Staphylococcus Источники инфекции Больной человек, носители инфекции (человек (распространено хроническое носительство среди медицинского персонала (госпитальные штаммы микроорганизма)), домашняя птица, свиньи, крупнорогатый скот) Механизмы и пути заражения Аутоинфекция Экзогенная инфекция При снижении защитных сил организма – различные повреждения кожи и слизистых оболочек, микротравмы Контактно-бытовой, воздушно-капельный, воздушно-пылевой, алиментарный Схема 6 Заболевания, вызываемые представителями рода Staphylococcus St.aureus St.epidermidis St.saprophyticus Гнойно-воспалительные заболевания кожи и подкожной клетчатки: карбункулы, фурункулы, абсцессы, маститы; поражения респираторного тракта: бронхиты, пневмонии, плевриты; инфекции ЛОР-органов: тонзиллиты, ангины, гаймориты, отиты; поражения опорно-двигательного аппарата: артриты, миозиты, остеомиелиты; инфекции желчевыводящих путей: холангиты, холециститы; инфекции мочевыводящих путей: уретриты, циститы, пиелонефриты, простатиты, гломерулонефриты; раневые инфекции; инфицирование сосудистых катетеров, протезов; перитониты, псориаз, рожистое воспаление, сепсис, септикопиемия, синдром токсического шока, пищевые интоксикации. Эндокардиты, инфицирование суставных протезов, инфицирование сосудистых катетеров и протезов, глазные инфекции: коньюнктивиты, язвы роговицы; инфекции мочевыводящих путей: уретриты, циститы, пиелонефриты, простатиты, гломерулонефриты. Эндокардиты, инфекции мочевыводящих путей: уретриты, циститы, пиелонефриты, простатиты, гломерулонефриты. Схема 7.1 Основные принципы микробиологической диагностики стафилококковой инфекции Материал для исследования: гной, мокрота, мазки из зева, отделяемое носоглотки, раневое отделяемое, пунктаты из очагов воспаления, кровь, спинномозговая жидкость, рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, подозрительные продукты Бактериоскопический метод Окраска мазков-препаратов по методу Грама с последующей микроскопией I этап Бактериологический метод Посевы на элективные и дифференциальнодиагностические среды Сахарный бульон Молочносолевой агар Кровяной агар Молочножелточносолевой агар Мясо-пептонный агар Тиогликолевая среда Агар с колистином Солевой агар с маннитом Агар с налидиксовой кислотой Инкубация посевов в термостате при 37°С 18-24 ч IIэтап Пересев типичных колоний на скошенный агар для получения чистой культуры Инкубация в термостате при 37°С 18-24 ч Схема 7.2 III этап Идентификация полученной чистой культуры 1 2 3 По морфологическим свойствам По культуральным свойствам По биохимическим свойствам Окраска по методу Грама Анализ полученных колоний Ферментация глюкозы и маннита в анаэробных условиях (посев на «пестрый» ряд Гисса), определение плазмокоагулазной и каталазной активности, определение фосфотазы, ДНК-азы и др. 4 5 По антигенным свойствам Типирование бактериофагами, реакция преципитации в геле со специфическими антисыворотками Определение чувствительности к антибиотикам Метод дисков Метод серийных разведений Серологический метод Иммуноферментный анализ, реакция прямой гемагглютинации, тест латекс-агглютинации Биологическая проба Объект исследования: белые экспериментальные мыши, котята Цель исследования: определение стафилококкового энтеротоксина Профилактика и лечение гнойно-воспалительных заболеваний, вызванных представителями рода Staphylococcus Схема 8 ПРОФИЛАКТИКА Неспецифическая Специфическая - соблюдение элементарных норм и правил личной и общественной гигиены; - адекватная дезинфекция больничных помещений и медицинского инструментария; - адекватная и рациональная антибиотикотерапия, во избежании хронизации процессов и формирования лекарственной устойчивости микроорганизмов - убитые вакцины (обеспечивают образование высокого титра антител в крови); - стафилококковый анатоксин Схема 9 ЛЕЧЕНИЕ Полусинтетические пенициллины: оксациллин амоксициллин Цефалоспорины: цефалоридин цефазолин цефалотин цефалексин Карбопенемы: клоксациллин Ванкомицин Макролиды ТЕСТОВЫЙ КОНТРОЛЬ 1. Семейство Micrococcacae представлено: а) грамположительными кокками разных родов; б) грамотрицательными кокками разных родов; Линкозамиды в) палочковидными микроорганизмами разных родов. 2. Представители рода Streptococcus в мазках-препаратах: а) имеют элипсовидную форму, располагаются в виде цепочек; б) имеют нитевидную форму, располагаются хаотично; в) имеют шаровидную форму, располагаются скоплениями в виде гроздьев винограда. 3. Представители рода Neisseria: а) не требовательны к питательным средам, обладают выраженной сахаролитической и протеолитической активностью; б) на простых питательных средах не растут, обладают выраженной биохимической активностью; в) культивируются на средах с содержанием человеческого белка, не обладают протеолитическими ферментами, сахаролитическая активность не выражена. 4. По типу дыхания стафилококки: а) факультативные аэробы; б) строгие аэробы; в) факультативные анаэробы. 5. Межвидовая дифференцировка микроорганизмов осуществляется по способности продуцировать ферменты: а) плазмокоагулаза; б) протеаза; в) ДНК-аза; г) аминотрансфераза; д) лецитиназа. рода Staphylococcus 6. Staphylococcus aureus способен выделять токсины: а) эксфолиативные; б) лейкоцидины; в) эндотоксин; г) энтеротоксины; д) мембранповреждающие (гемолизины). 7. Избирательными средами для культивирования Staphylococcus aureus являются: а) желточно-солевой агар; б) среда Эндо; в) молочно-солевой агар; г) картофельно-угольный агар. 8. Staphylococcus aureus характеризуется морфо-функциональными особенностями: форма _____________________________________________________________ взаиморасположение клеток в мазках-препаратах _________________________ _____________________________________________________________________ окраска по Граму______________________________________________________ наличие капсулы ______________________________________________________ подвижность _________________________________________________________ спорообразование ____________________________________________________ тип дыхания __________________________________________________________ тип питания __________________________________________________________ 9. При культивировании на желточно-солевом агаре Staphylococcus aureus образует колонии: форма _____________________________________________________________ характер поверхности _________________________________________________ цвет _______________________________________________________________ прозрачность ________________________________________________________ характер краев ______________________________________________________ другие особенности __________________________________________________ 10. При культивировании на кровяном агаре Staphylococcus aureus образует колонии: форма _____________________________________________________________ характер поверхности _________________________________________________ цвет _______________________________________________________________ прозрачность ________________________________________________________ характер краев ______________________________________________________ другие особенности __________________________________________________ 11. Указать углеводы которые расщепляет Staphylococcus aureus и конечные продукты расщепления (+К или +(К+Г)): Глюкоза Лактоза Сахароза Маннит Мальтоза 12. С образованием каких продуктов Staphylococcus aureus расщепляет белки: а) сероводород; б) индол; в) аммиак. 13. Различные виды стафилококков способны продуцировать ферменты: Ферменты Плазмокоагулаза Лецитиназа Фосфотаза ДНК-аза St. aureus St. epidermidis St. saprophyticus 14. Расположить в порядке возрастания сахаролитической активности микроорганизмы: Staphylococcus aureus, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogene: 15. Расположить в порядке убывания протеолитической активности микроорганизмы: Staphylococcus aureus, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes: 16. Определить чувствительность Staphylococcus aureus к антибиотикам: 1 1 – пенициллин; 2 – гентамицин; 3 – нистатин; 4 – ремантадин. 2 3 4 Результат: