РОССЕЛЬХОЗНАДЗОР Федеральное государственное бюджетное учреждение «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» ФГБУ «ВГНКИ» Совершенствование специфической профилактики бруцеллеза животных в Российской Федерации Заведующий лабораторией качества и стандартизации бактерийных лекарственных средств, д.в.н. О.Д. Скляров www.vgnki.ru Эпизоотологические данные по бруцеллезу крупного рогатого скота в период с 2010 по 2020 800 700 682 600 627 500 400 277 200 223 218 100 0 233 293 228 376 364 355 2010 10,6 209 194 2011 186 128 10,8 2012 398 264 161 112 8,5 430 393 367 385 360 300 567 575 538598 569 499 12,8 2013 13,8 2014 9,8 2015 7,7 2016 9 2017 164 5,9 2018 176 6,6 2019 208 9,6 2020 Выявлено н.п. КРС в течение года Оздоровлено н.п. КРС в течение года Осталось н.п. на конец года Заболело, тыс. гол. Линейная (Выявлено н.п. КРС в течение года) Линейная (Оздоровлено н.п. КРС в течение года) Линейная (Осталось н.п. на конец года) Линейная (Заболело, тыс. гол.) www.vgnki.ru Эпизоотологические данные по бруцеллезу мелкого рогатого скота в период с 2010 по 2020 гг. 60 54 50 57 51 51 53 51 45 43 40 40 38 36 30 20 29 29 31 30 32 25 17 16 2,1 2010 1,8 2011 35 32 24 26 21 22 20 0 35 28 24 10 38 0,9 2012 1,9 2013 2,5 2014 2,2 2015 1,22 2016 14 0,44 2017 15 15 1,18 2018 0,96 2019 0,66 2020 Выявлено новых н.п. МРС в течение года Оздоровлено н.п. МРС в течение года Осталось н.п. на конец года Заболело, тыс.гол. Линейная (Выявлено новых н.п. МРС в течение года) Линейная (Оздоровлено н.п. МРС в течение года) Линейная (Осталось н.п. на конец года) Линейная (Заболело, тыс.гол.) www.vgnki.ru ВАКЦИННЫЕ ШТАММЫ И БРУЦЕЛЛЕЗНЬЕ ВАКЦИНЫ в Российской Федерации № П/П НАИМЕНОВАНИЕ ШТАММА 1 2 3 4 B.ABORTUS 82 B.ABORTUS 75/79-AB B.ABORTUS 19 B.MELITENSIS REV-1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 ГОД ВНЕДРЕНИЯ ВИД ЖИВОТНЫХ ВНЕДРЕНЫ В ПРАКТИКУ К.М. САЛМАКОВ К.В. ШУМИЛОВ И.П. НИКИФОРОВ И ДР. J.M.BUCK S. ELBERG М. HERZBERG КРС КРС КРС, ОВЦЫ ОВЦЫ, КОЗЫ + + + + B.ABORTUS KB 17/100 1997 B.ABORTUS 45/20 1922 B.MELITENSIS 53H38 B.ABORTUS 104 М 1970 B.ABORTUS RB-51 1993 К.В. ШУМИЛОВ В.В. КАЛМЫКОВ Mc EVEN A.D RENOUX G. К.В. ШУМИЛОВ, Х.С. КОТЛЯРОВА Герхардт Шуриг и др. B1982 КРС КРС КРС, МРС КРС, ОВЦЫ коровы + + + + + B.аbortus 21 B.abortus 8 B.abortus B-8 B.abortus 7/26 B.abortus 519 B.abortus 82 ПЧ B.фbortus B-1 B.abortus 4004/1 B.abortus 16/4 B.abortus 70 В. melitensis 56 В. melitensis К-24 В. melitensis «Невский 12» В. melitensis «Невский 13» В. melitensis 89/23 B.suis 61 1971 1959 В.С. Рягузов П.Н. Жованик П.Н. Жованик П.Н. Жованик И.А. Косилов К.М. Салмаков, Г. А. Белозерова Е.С. Орлов Е.С. Орлов П.А. Триленко К.П. Студенцов Е.С. Орлов, А.А. Клочков П.А. Триленко И.Н. Невский, М.С. Абиджанов крс крс крс крс крс крс крс крс крс крс крс овцы, козы крс - 1980 Р.Г. Яраев, К.В. Шумилов и др. крс - 1964 Л.В. Кириллов М.К. Юсковец крсwww.vgnki.ru крс - 1960 1996 1952 (1953) 1974 1960 1955 1955 1980 1966 1979 1948 1962 1967-71 АВТОРЫ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ БРУЦЕЛЛЕЗНЫХ ВАКЦИН В СССР-РФ Система вет.-сан. и оздоровительных мероприятий, включающая применение средств специфической профилактики (период) Кол-во неблагополучных пунктов Заболело, тыс. гол. Больных на конец года, тыс. гол. 1.Без применения средств специфической профилактики: 1902 – 1952 гг. 13580 279,6 249,3 2. Иммунизация телок и коров живой сухой вакциной из шт. B.abortus 19: 1953-1970 гг. 3519 156,2 102,9 3 Иммунизация вакциной из шт. B.abortus 19 только телок 5-8 месячного возраста: 1971 - 1974 гг. 5570 286,7 148,3 128 9,057 0,216 4.1975-2019 ( 9 мес.) гг.: иммунизация живой сухой вакциной из шт. B.abortus 82 телок и коров; вакциной из шт. В. abortus 19 - телок 5-8 мес. возраста; с 1997 г. по наст. время - еще и живой сухой вакциной из шт. В. abortus 75/79-АВ. Инактивированной адъювант-вакциной из шт. B.abortus KB 17/100. www.vgnki.ru ВАКЦИНЫ ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА , ВЫПУСКАЕМЫЕ И ПРИМЕНЯЕМЫЕ В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ В ПЕРИОД С 2010 ПО 2019 гг. ВКЛЮЧИТЕЛЬНО ВАКЦИНА ИЗ ШТАММА 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018 2019 2020 КРУПНЫЙ РОГАТЫЙ СКОТ, ТЫС. ГОЛ. B. ABORTUS 82 1722, 303 1608, 506 1669, 541 1740, 735 1915, 381 1692, 519 1400, 867 1261, 378 1644, 324 1612, 421 1783, 315 B. ABORTUS 75/79-АВ 134, 593 111, 370 91, 258 74, 409 110, 106 108, 453 117, 408 89, 067 81, 651 80, 457 69, 426 B. ABORTUS 19 12,53 3 11,23 9 13,43 7 11,53 3 12,82 5 11,10 1 8,226 5,599 8,078 8,492 7,961 МЕЛКИЙ РОГАТЫЙ СКОТ, ТЫС. ГОЛ. B. MELITENSIS REV-1 B. ABORTUS 19 3959, 003 3153, 001 3510, 586 4626, 785 3921, 257 1879, 209 3439, 033 2057, 894 3352, 337 3293, 63 3437, 027 1694, 585 1662, 322 1572, 127 1650, 148 1478, 597 1393, 122 1318, 327 944, 315 1180, 021 www.vgnki.ru 1227, 766 1271, 859 Как видно из материалов таблицы вакциной из штамма B. aborus 82 в течение последних 11 лет ежегодно было иммунизировано до двух миллионов голов крупного рогатого скота (от 1261,3 тыс. голов в 2017 году до 1915,3 тыс. голов 2014 году). Несмотря на это, сегодня вакцина, как, впрочем, и практически все другие живые вакцины, не вполне отвечает требованиям ветеринарной практики. Вакцина является абортогенной. Однако, в значительной степени эта проблема решается иммунизацией телок в 4-6 месячном возрасте. В последующем сенсибилизированные животных могут быть иммунизированы против бруцеллеза в период стельности. Но это, как правило не осуществляется, так как ревакцинацию взрослого маточного поголовья осуществляют массово в летние месяцы после отела. Согласно инструкции по ветеринарному применению вакцины против бруцеллеза из слабоагглютиногенного штамма бруцелла абортус №82 сухой живой, утвержденной Россельхознадзором 31.01.2019: «В хозяйствах благополучных по бруцеллезу при угрозе инфицирования животных бруцеллами, а также в которых заболевание бруцеллезом установлено впервые, решение о вакцинации коров, принимают сразу после установления диагноза, но не ранее чем через 1,5 месяца после отела» www.vgnki.ru Вакцина против бруцеллеза из слабоагглютиногенного штамма бруцелла абортус №82 живая сухая, разработанная К.М. Салмаковым используется нашей стране с 1974 года и по настоящее время. Вакцинный штамм был получен в 1961 году путем селекции из популяции колоний исходного штамма, выделенного из абортированного плода коровы совхоза Татарстан ТАССР. Штамм 82 относится к 6-ому биотипу B. abotrtus и является диссоциантом (SRформа). Широкое применение вакцины из данного позволило снизить уровень заболеваемости крупного рогатого скота бруцеллезом в масштабах страны. По состоянию на сегодняшний день вакцина из штамма №82, является одной из наиболее широко применяемых в Российской Федерации для специфической профилактики крупного рогатого скота. На сегодняшний день К.М. Салмаков считает целесообразным сократить кратность введения вакцины. www.vgnki.ru Безусловно, существует проблема вынужденной вакцинации стельных животных, ранее не вакцинированных против бруцеллеза, в хозяйствах при первичном установлении диагноза на бруцеллез. Речь идет о хозяйствах, в которых специфическая профилактика бруцеллеза не осуществляется. При этом следует учитывать, что все живые бруцеллезные вакцины, в том числе и вакцины, изготовленные из культур штаммов бруцелл в R-форме при введении стельным инфицированным полевыми культурами бруцелл провоцируют у них злокачественные аборты. www.vgnki.ru На сегодняшний день также остается проблемной серологическая дифференциация поствакцинальных бруцеллезных антител от антител к полевым культурам бруцелл. Однако, в отличие от живых высокоагглютиногенных вакцин, в случае применения вакцины из штамма №82 это решается с помощью серологического исследования животных в реакции иммунодиффузии с ОПС-антигеном по истечении 1,5 месяцев после иммунизации. Через 6 месяцев животных, иммунизированных данной вакциной исследуют с использованием всех тестов, предназначенных для диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота (РА, РСК, РНГА) на общих основаниях. Конечно в хозяйства, где животные не идентифицированы и нет учета проведения специальных ветеринарных профилактических обработок проблема исследования животных усугубляется. С учетом вышеизложенного представляется, отказываться от данной вакцины преждевременно и что редакция инструкции по применению вакцины из www.vgnki.ru штамма №82 не требуется. Инактивированная адъювант-вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота из штамма B. abortus КВ 17/100 была разработана в ФГБУ «ВГНКИ» в 1997 году. Штамм Brucella abortus КВ 17/100 получен путем целенаправленной селекции культуры вакцинного штамма B. abortus 104М. Штамм Brucella abortus КВ 17/100 не имеет поверхностных A- и M-антигенов, характерных для бруцелл в S-форме. Обладает низкой остаточной вирулентностью и стабильностью свойств при культивировании на питательных средах. Штамм вызывает у вакцинированных животных синтез R- и не вызывает синтез S- бруцеллезных антител. Многократные пассажи штамма КВ 17/100 через организм морских свинок и поддержание на питательных средах в течение 10 лет показали высокую стабильность его биологических свойств. Штамм депонирован в коллекции регистрационным № КВ 17/100-ДЕП. микроорганизмов ФГБУ www.vgnki.ru «ВГНКИ» с При создании вакцины из данного штамма использовали адъювант на основе полиэтилсилоксановой жидкости (ПЭС-3) и эмульгатора Т3. В итоге удалось получить стойкую и умеренно вязкую эмульсию типа «вода-масло». В процессе производства и выпуска вакцины состав адъюванта изменяли. Иммуногенность экспериментальной вакцины изучали комиссионно в течение 5 лет в опытах на морских свинках на базах УзНИВИ и НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи. Вакцинация обеспечивала защиту 50-70% иммунизированных морских свинок от заражения 10 минимальными инфицирующими дозами культуры вирулентного штамма B. abortus 54М/ВГНКИ. www.vgnki.ru В производственных условиях в хозяйствах Саратовской области на крупном рогатом скоте были изучены реактогенные, антигенные и сенсибилизирующие свойства адъювант-вакцины и ее профилактическая эффективность. В ходе испытаний была установлена ее высокая эффективность при оздоровлении хозяйств неблагополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота, вакцина не индуцировала синтез S-бруцеллезных антител при двукратной иммунизации 3-6-месячных телок и половозрелого скота. Отсутствие поствакцинальных реакций с S-бруцеллезным антигеном обеспечивало возможность проведения серологических исследований животных на бруцеллез независимо от сроков вакцинации, что способствовало быстрому удалению больных животных из оздоравливаемых стад. www.vgnki.ru С учетом результатов экспериментальных исследований и широкого производственного испытания адъювант-вакцины из штамма В. abortus КВ17/100 против бруцеллеза крупного рогатого скота в шести районах Саратовской области Департаменту ветеринарии Минсельхозпрода РФ было направлено предложение о внедрении препарата в ветеринарную практику. Производство и применение вакцины было одобрено. В ФГБУ «ФГНКИ» были разработаны ОСТ 10-19-003-00 Адъювант- вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота из штамма Бруцелла аборту КВ 17/100. Регламент изготовления и контроля адъювант-вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота из штамма Brucella abortus КВ 17/100, утвержденные 09.03.1999 директором института А.Н. Паниным и Наставление по применению адъювант-вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота из штамма Brucella abortus КВ 17/100, утвержденное Департамента ветеринарии www.vgnki.ru Производство вакцины было освоено ФКП «Щелковский биокомбинат», Россия, Московская область, Щелковский район. Регистрационный номер ПВР-1-2.1/00773, дата регистрации 25.07.2003, дата окончания действия регистрационного свидетельства 25.07.2008. www.vgnki.ru Прекращение производства вакцины было обусловлено ее реактогенностью, проявившейся формированием выраженных припухлостей у крупного рогатого скота при подкожном введении в области подгрудка диаметре около 30 см в диаметре период применения в Ставропольском крае. Сходная реактогенность была характерна для двух других адъювантвакцин со сходной противоэпизоотической эффективностью, в частности вакцины «Abortox» из штамма B. aborus 45/20 и «Aborlane» и штамма 53H38 производства Франции, широко апробированных в нашей стране, в том числе в трех хозяйствах Октябрьского сельского района Ростовской области в период с 1994 по 1998 гг. Как правило, с течением времени припухлости уменьшались и через год-два их размер был сопоставим с размером яблока, а позже и куриного яйца. При этом абсцедирования указанных припухлостей не наблюдалось. www.vgnki.ru С учетом эпизоотической ситуации по бруцеллезу крупного скота, сложившейся в Российской Федерации в настоящее время, производство и применение адъювант-вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота из штамма Brucella abortus КВ 17/100 следует считать целесообразным. При этом необходимо предусмотреть совершенствование вакцины в части использования при ее производстве современного стандартного адъюванта, апробированного при производстве других бактерийных или вирусных вакцин против болезней крупного рогатого скота. www.vgnki.ru Таким образом применение вакцины возможно с целью профилактической иммунизации крупного рогатого скота в субъектах Российской Федерации, неблагополучных по бруцеллезу данного вида животных, в том числе с целью провокации латентных форм бруцеллеза у крупного рогатого скота на самых ранних этапах проведения оздоровительных мероприятий. Этот обусловлено тем, что культура вакцинного штамма, представленная бруцеллами в R-форме, не вызывает у животных синтез S-бруцеллезных антител, но провоцирует его у животных, инфицированных полевыми вирулентными культурами бруцелл, находящимися в S-форме, без риска спровоцировать аборты у стельных животных, ранее не иммунизированных против бруцеллеза. www.vgnki.ru Результаты сравнительного серологического, молекулярно-генетического и бактериологического исследования на бруцеллез и иерсиниоз 14 образцов сыворотки крови, 11 образцов молока и 96 образцов лимфатических узлов и внутренних органов коров из неблагополучного по бруцеллезу хозяйства www.vgnki.ru Результаты производственного испытания адъювант-вакцины из штамма В. abortus КВ17/100 против бруцеллеза крупного рогатого ско¬та свидетельствуют о том, что вакцина экологически безопасна, неагглютиногенна, неабортогенна, обеспечивала у животных формирование иммунитета достаточной напряженности для защиты от заражения бруцеллезом. Вакцина также позволяет выявлять поголовье крупного рогатого скота с латентной формой течения болезни и, тем самым, препятствует ее широкому распространению. Производство вакцины было освоено ФКП «Щелковский биокомбинат. Всего было выпущено 197 тысяч. Вакцина была реализована и использована в животноводческих хозяйствах преимущественно в Саратовской области и в небольшом количестве - Краснодарского края и Ставропольского края. В заключение следует указать, опыт применения вакцины оказался явно недостаточным для вывода о замене живых бруцеллезных вакцин, применяемых для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. В тоже время полученные результаты позволяют считать, что применение вакцины при определенных эпизоотических ситуациях в www.vgnki.ru животноводстве эффективно. По состоянию на сегодняшний день ФКП «Щелковский биокомбинат» практических готов к изготовлению опытных серий вакцины на основе современных апробированных адъювантов. Которые с успехом применяются при производстве вакцин против других разных болезней крупного рогатого скота. Соответственно в процессе их испытания будет оценена безвредность, реактогенность. www.vgnki.ru Спасибо за внимание! www.vgnki.ru