Министерство сельского хозяйства РФ федеральное государственное бюджетное обржовательЕое уr{реждеЕие высIпего образования < Бурятская государстRеняая сельскохозяйственная академия имени В.Р. ФилипIIoвa>> Факулътет ветерин арной медицины Кафедра <<Терапия, клиническая диагностика, акушерство и биотехнология)). Курсовая работа По дисциплине Акушерство и гинекология На тему: Искусственное осеменение коров и телок Выполнила: Русанова К.В. студентка 4 курса группы 240i-lB Проверил: д.в.н,, профессор Мантатова Н.В. Оценка: C.rШa,laltto Улан-Удэ,202|r. 2 ввЕдЕниЕ искусственное осеменение коров полъзуется пошулярностью по tIричине повышения спроса на мясную и молочную rrродукцию, Это послужило причиной дJIя животноводов задуматься о новой методике рЕtзмноЖения скота, rrосколькУ даже н€lJIичие в стаде производителей не гарантирует стабильный прирост голов. Кроме того, во время естественного осеменения коров часто Сл)л{аются травмы или передаются инфекционные заболевания. д это отрицателъно сказывается цриросте стада. По этой причине искусственное осеменение помогает решить проблему пополнения нового потомства в стаде и точно определить, когда наступает BpeMrI отела. искусственное осеменение на современном этапе р€ввитиrI скотовоДства явJUIется основным зоотехническим методом воспроизводства крупного рогатого скота и имеет следующие преимущества: о возможность широкого исшользования выдающихся быков- производителей не только отечественной селекции, но И МИРОВОГО генофонда; о усиление роли целенаправленного отбора и подбора, приводящего к повышению генетической ценности маточного поголовья; значительное снижение доли риска пол)лIения , потомства с нежелателъными генетическими характеристиками ; сведение к минимуму возможности заражения инфекционными болезнями, передающимися половым путем; профилактика заболеваний репродуктивных органов самок, снижение бесплодия и яловости. ,Щостоинства искусственного осеменения животных в полной мере раскрываются топько при целенаправленной племенной работе и определенных организационно-хозяйственных условиях: полноценном кормлении и правилъном содержании животных, н€LIIичии индивидуапьного учета и квшифицированных операторов по искусственному осеменению, обеспечении пунктов искусственного осеменения необходимыми помещениями, оснащении их специ€tлъным оборудованием и реактивами. щелью данной работы является из)чение методов искусственного осеменения и их практическое применение. Задачи данной работы: . описать методы искусственного осеменения Крс; о определить охоты и время искусственЕого осеменения короВ; о Произвести искусственное осеменеЕие коров. Дктуальностъ темы обусловлена тем, что современное ВеДеНИе сельского хозяйства базируется на интенсивном использовании ТОЛЬКО л)чших генотипов животных, что подрЕвумевает пол)п{ение максимальнОй прибыли при одинаковом уровне финансовых и материалъных вложениЙ. Исходя из этого, предпочтеЕие будет отдаваться тем породам, которые шРи одинаковых с другими породами финансовыми и матери€tпьными затратами производят болъше продукции - мяса, молока, шерсти и гlр. Это все обусловило необходимость разработки способа, который позволял бы быстро и целенаправленно изменять генофонд отделъных популяций и стад сельскохозяйственных животных. Это достигается, в первую очередъ, за счет использования метода искусственного осеменениf, . 4 1. Литературный обзор 1.1. Физиологические основы воспроизводства коров Неотъемлемым понrIтием воспроизводства является понятие зрелости организмц т.е. его готовности к воспроизводству потомства. Различают физиологическую и половую зрелость, или физиологическое и половое созревание. Половая зрелость самки - возраст, в котором животное обретает способность к р€Lзмножению (способно оплодотвориться), совпадает с проявлением первой половой охоты. Физиологическая зрелость самки - возраст, когда животное способно полноценно выноситъ и родить полноценный плод. Половая зрелость не совпадает с физиологической, т.е. оплодотвориться животные становятся способными раньше, чем становятся способными выносить плод. Половая зрелость совпадает с начапом выработки яичками самцов спермы, а яичниками самок яйцеклеток. Физиологическая зрелость характеризует завершение полноценного р€ввития половьIх придаточных желез у самцов и матки у самок. Показатели нормЕtльного воспроизводителъного процесса самок крупного рогатого скота представлены в таблице 1. Таблица 1. Показатели воспроизводительного процесса у самок круrrного рогатого скота. показатели Возраст, месяцы: Полового созревания Наступление племенной зрелости телок ПродолжитеJIьность: Полового цикла, дни Охоты, часы Течки, часы Стельности, дни Наступление овуJuIции посло окончilния охоты, часы 5 Среднее Нормальные значение вариации 10 5-14 15 12-i8 2\ 1б-l8 l+ 18-24 1.5-48 285 6-50 270-295 1r] 5-1 6 Возобновление функции после отела, дни: Яичников Матки зб 12-9з aа f о z,:- l 6 46 Основной критерий воспроизводства стада - продолжителъность межотельного периода в большей стешени зависит от показателей осеменения коров и телок [14]. Таблица 2. Оптимальные параметры воспроизводства в высокопродуктивных стадах. Параметры показатели з65-з 85 >85 Межотельный период, дни Вьrход телят, О/о Сервис-период, дни Количество коров, О/о С сервис-периодом более 120 дней ОсемененньIх в течение трех месяцев после отела Стельньпс коров после трех осеменений Сроки, дни: Проявления первой охоты после отела Первичньгх осеменений Эффективность определения охотьт, О% Возраст первого осеменения телок, месяцы Стельность от первичньIх осеменений, Yо: Коров Телок s90-1 10 10 90 80 До 40 45-б0 90 15-17 50_60 70 и более 1.1.1 Половые органы коров и телок, их функции. Щля реryлярного воспроизводства органы р€}змножениrI самки крупного рогатого скота должны выполнять следующие функции: . производить половые клетки (яйцеклетки) при реryлярных половых циклах; . способствовать продвижению яйцеклетки и сперматозоидов к месту оплодотворения; о создавать необходимую среду для оплодотворения яйцеклетки, рЕввития эмбриона, обеспечиватъ a.о норм€tльное "rarпантацию рuввитие плода до его рождения; и плацентацию, а также обеспечиватъ в конце внутриутробного развития процесс родов, а также выведение IIпаценты и восстановление половой системы после отела для повторения воспроизводительного цикла. К половым органам самок относятся: вульва, клитор, преддверие влагапища, влагаJIище, матка, шейка матки, тело матки, рога матки, яЙцеводы, яичники. Вульва - наружн€lя часть половых органов. Она состоит из двух половых ryб и вертик€tлъно расположенной между ними половой щели. снаружи половые ryбы покрыты кожей, а изнутри слизистой оболочкой. В коже размещено много rтотовых и с€lJIъных желез. В толще половых ryб расположен сжиматель вулъвы. Вулъва у молодых самок значительно меньше, чем у старых. У здоровых животных половая щель закрыта. К концу беременности особенЕо у старых самок при лактации половм щелЬ ЗИЯеТ. Такое состояние может быть и у небеременных самок ttри СлабОСТИ связочного аппарата, обусловленную недостатком движения или ДРУГИМИ факторами. При этом возможно проникновение микробов в половые орГаны, что может вызватъ бесплодие. Клитор - рудимент полового члена самца. Он находится в нижнем УГлУ половой щели в виде некоторого возвышения. Клитор состоит из двух ножек, прикрепляющихся у седаJIищным буграм. Соединяясь между собой, они образуют тело клитора, заканчивающееся головкой. Головка клитора имееТ M€IJIeHbKoe кавернозное тело, покрытое белочной оболочкой. По ней проходят кровеносные сосуды и нервы, имеющие р€lзличные окончания и обладающие высокой чувствительностью. Предварительный масс€Dк клитора перед осеменением способствует раскрытию шейки матки, усилению ее сокращения, как и рогов, обеспечивая более быстрое проникновение спермиев в глубокие участки полового тракта. Это повышает оплодотворяемость самок. Преддверие влагапища - короткая трубка, начинающаяся от половой щели и заканчивающаяся у отверстия мочевого канапа. Его KaHarr направлен 7 снизу вверх и вгIеред. У старых истощенЕых животных преддверие влаг€rпища несколько втягивается в тzlзовую полостъ. У коров отверстие мочевого канала р€вделено поперечной складкой на две части. Передняя часть ведет в мочеиспускательный канап, а заднrIя образует дивертикул глубиной в 2 см. Эти анатомические особенности необходимо rIитывать во время введения катетера при искусственном осеменении коров с ректальной фиксацией шейки матки при осеменении без зеркала. Непосредственно впереди мочеиспускателъного канаlrа на границе преддверия и влагапища находится поперечная складка слизистой оболочки - рудимент девственной плевы. Стенка преддвериrI влагапища состоит из трех оболочек: слизистой, мышечной и соединительнотканной. Слизистая оболочка образует складки различной толщины. Под слизистым слоем боковых стенок преддверия влагЕLлища з€Lпожены парные большие tIреддверные железы, их выводные протоки открываются самостоятельными отверстиями на боковых стенках преддвериrI, выделяя беловатый муциноподобный секрет. Этим секретом увлажняется слизистая оболочка преддверия влагалища во время половой охоты (и при родах), облегчая прохождение пениса в преддверие и во влагалище, а также плода. Позади и по бокам от отверстиrI мочевого канала расположены многочисленные выводные протоки мапых преддверных желез. Влага-пище - мускульно-эластичная трубка от преддверия влагалища до влагалищной части шейки матки. Оно находится в тазовой области над прямой кишкой. Это орган совокупления самки и родовые пути для прохождения плода. Передний конец влагалища расширен и образует над влагалищной частью шейки матки свод. Он хорошо развит у коров. Слизистая оболочка влагаlrища не имеет желез, образует многочисленные продольные складки (у свиней их нет). Мышечная оболочка тонкая и состоит из циркупярногс и продолъного слоев гладкой мускулатуры. Матка у коров двурогая. Расположена она под прямой кишкой и свободно подвешена на широкой маточной связке, которая закреплена на поясничных мышцах. У коров она лежит, частично, в брюшной поJIости, частично, в т€Lзовой. Матка служит для перемещения спермиев к яйцеводам, р€ввития и питания зародыша, вынашиваниrI и вытапкивания плода, изгнания последа. Она состоит из шейки, тела и рогов. Шейка матки является задней частью матки, внутри ее проходит узкиЙ кан€Lп, который открывается только во время течки и половой охоты, родов и при некоторых патологических процессах. Шейка матки коров своеобразный орган, который способен накапливатъ спермии и сохранять их жизнеспособность дольше, чем какой-либо другой yIacToK rrолового тракта самки (до 48 часов), она отделяет подвижные спермии от жидкой части спермы, мертвые спермии и микроорганизмы. Канал шейки выстлан слизистой оболочкой, которая образует многочисленные плотно прилегающие друг к другу продольные и поперечные складки. Последний складчатый в€tlIик формирует влагаlrищЕую часть шейки матки, которая вдается во влагалище на глубину 2-4 см. У старых коров влагаJIищная часть сильно гипертрофирована и имеет вид розетки (цветной капусты); у телок она гладкая, равномерно выпуклая. Шейка имеет три оболочки: слизистую, мышечную и серозную. Слизистая оболочка покрыта цилиндрическим эпителием. Она выделяет муциновую слизь, которая обладает биологически важными свойствами: бактерицидностью. В абсорбцией, слизи бактериостатичностъю и содержатся вирусингибирующие и вируснейтрализующие вещества. В период готовности животного к сл}л{ке ее цервик€tльный канаJI заполнен желеобразным секретом с высоким содержанием глюкопротеидов. Последние имеют мицеллярное строение, причем мицеллы располагаются пар€Lллельными рядами. Отмеченная особенность позволяет рассматривать шейку как своеобразный биологический фильтр, который бестrрепятственно пропускает спермии благодаря присущей им способности к активному движению против тока жидкости, но задерживать микробы и простейшие. 9 Тело матки расположено между шейкой и рогами. По сравнению с шеЙкоЙ матки оно более мягкое. У коров оно расположено в тазовой области, у других животных в основном в брюшной полости [5]. Рога матки, левый и правый, отходят от ее тела. Сверху слияние рогов выражено в виде борозды (желоба). Этот межроговый желоб легко прощупывается через прямую кишку и имеет болъшое значение при Диагностике беременности и бесплодия. Место р€вдвоениrI рогов н€вывается бифуркацией. От тела рога матки р€вветвляются и тянутся вначЕшIе немного вверх и в стороны, затем вниз и Еазад, а концы поднимаются вверх и, сУЖиваясь, переходят в яйцеводы. В результате такого расположения рога матки изогнуты в виде бараньих рогов. Тело и рога матки имеют слизистую оболочку, мускульный слой и серозную оболочку. Слизистая оболочка (эндометрий) выстлана однослойным цилиндрическим реснитчатым эпителием. Оболочка имеет многочисленные извивающиеся трубочки, н€вываемые маточными железами. Их отверстия можно видеть некоторое ВреМя после родов и во время беременности. У коров насчитывается свыше 100 тысяч желез, в основном в рогах. Они выделяют секрет (маточное молочко), которыЙ питает зародыш до образования плаценты. У жвачных на СлиЗистоЙ оболочке тела и рогов матки имеются специ€lльные образованиrI - КаРУнкУлы. В теле матки они расположены беспорядочно, в рогах - в четыре продолъных ряда. Каждый карункул имеет углубление - крипту, в которые ВХОДЯТ ВОРсиНки сосудистоЙ оболочки плода и через них плод питается. С рЕtЗВиТием беременЕости размеры карункулов и крипт увеличиваются и их можно прощупать через прямую кишку, что имеет практическое значение при Диагностике беременности. Слизистая оболочка других животных не иМееТ карункулов, ее поверхность гладкая. Мышечная оболочка (миометрий) ПОДРаЗДеJUIеТСя На мощныЙ циркулярныЙ и более слабыЙ продольныЙ слои. МеЖдУ круговыми и продольными, мышечными слоями находится богатый СОСУДаМи и нервами сосудистый слой. Снаружи матка покрыта серозной оболочкой (периметрий). 10 яйцеводы - парные сильно извитые трубочки, расположенные в собственной, образованной брюшиной, складке. они выполняют несколько функций: перемещают спермии в переднюю часть яйцевода, а яйцеклетки и зиготы В матку, служат местом встречи гамет самца и самки и оплодотВорения яйцеклеток, а также р€rзвитиrl зиготы и бластоцисты. Различают брюшной и маточный концы. Брюшной конец более широкий и начинается возле яичника расширением - воронкой яйцевода. Неровные зубчатые края воронки пол)дили название бахромки яйцевода. В передней трети яйцевода (ближе к яичнику) происходит слиrIние яйцеклетки со спермиеМ. Вблизи рога матки яйцевод суживается, выпрямляется и без резких границ открывается в вершину рога матки. В стенке яйцевода рuвлич€lют три оболочки: слизист}ю, мускульЕую и серозную. Слизистая оболочка, особенно в ампулах и воронке яйцевода, образует многочисленные, сильно р€ввитые складки, покрытые цилиндрическим мерцательным эпителием, реснички которого направляют ток жидкости с яйцеклеткой В сторону матки, а при перемещении спермиев по яйцеводу они же направляют их в сторону яичников. Слизистая оболочка яйцеводов выделяет муциновый секрет, у коров и свиЕьи в нем содержится фермент ги€tпуроНидЕва, которая принимаеТ )л{астие в процессе оплодотворения. яичники - парные органы, в них образуются половые клетки самки яйцеклетки2 а также служащие игрЕIют важную роль в р€}звитии местом синтеза половых гормонов, которые и функционировании половой системы, ее ПОДГОТОВКИ К акту спаривания, процессу оплодотворениrI, наступлению и сохранению беременности. Яичники располагаются в брюшной гrолости. они подвешены на брыжейке яичника и специ€шьных связках, снаружи покрыты однослойным кубическим зачатковым эпителием. Под ним находится белочная оболочка. На разрезе яичника видны две зоны: наружная - корков€uI (фолликулярная) и внутреннrIя - мозговая (сосудистая). Корковая зона состоит из нежной соединительной ткани. В этом слое располагаются фолликулы и желтые тела. Мозговой слой обильно пронизан сосудами и 11 нервами. Зрелые фолликулы хорошо заметны на поверхности яичников в виде пузырьков [5]. t2 1 .2. Естественное осеменение Оплодотворение физиологический процесс, заключающийся в слиянии яйца и спермиев с последующеЙ их ассимиляцией-диссимиляциеЙ, в результате чего образуется новая клетка (зигота), обладающая двойной наследственностью. Естественное осеменение (слуrка) обеспечивается при контакте самцов и c€tiuol( путем введения спермы нешосредственно в половые пути самки (половой акт). Различают слу{ку вольную и ручную. вольная случка шредставляет собой спаривание, при котором самец самостоятелъно находит самок в охоте и покрывает их. При этом самец постоянно находится в стаде и может спариватъся с одной и той же самкой несколько раз или его пускают к самкам на период слу{ного сезона. Руr"ую сл)цку применяют во всех отраслях животноВоДСТВa' И ОНа позволяет производить подбор маток и производителей по качественным IIоказателям, опредеJIить готовность самки к осеменению, контролировать нагрузку на самца, не допускатъ распространения заразных болезней, вести зоотехнический учет и ylreT rrриппода и т. д. Спаривание (спучка) сельскохозяйственных животных биологический процесс, при котором сперма производителя вводится в половые пути самки с целъю опподотворения. Правильное проведение случки - важное условие в борьбе с яловостью и в повышении выхода приплода. время спаривания (слу.rки) животных определяется по их поведению, а матки, истечение слизи, расслабление и раскрытие шейки матки [10]. |.2.|. Половой цикл Половым циклом у самок млекопитающих н€tзывается период межДУ двумя половыми охотами. 1з НормалЬная проДолжитеJIъность поJIового цикла у коров в среднем сосТаВляет2lДенъсВариацияМиот18до24.ПродолжиТельностъ цикла у телок обычно короче, чем у полового коров, НарядУсНорМzlJIъныМиПопроДоЛжителЬносТиПолоВыМицикЛаМиВ (до 17 дней) и удлиненные (более 24 дней) практике наблюдают укороченные циклы. Появление укороченных цикJIов у животных обычно связано с воспроизведения нарушениями нейроryморалъной реryпяции функции может быть у коров (кисты, гипофункционаJIъное состояние яичников), либо вызваны, как правило, между первой и второй охотами. Удлиненные циклы процессами в матке, эмбриональной смертностью или воспаJIиТельными основываясь на характере нервных реакций и морфофункционЕIIIъных \ изменениях, имеющих место в реIIродуктивных органах, д,п, Студенцов (1953) разделил половой цикл на три стадии: . стадиювозбуждения; о стадию торможения; . стадиюуравновешивания. в стадия возбуждения характеризуется последователъным вовлечением процессов течки, общей поповой реакции и охоты при цепь физиологических стадии нulJIичии в яичниках созревающих фолликулов, За проявление с возбуждения ответственны эстрогены, уровенъ которых в крови развитием признаков течки и охоты увеличивается и источником которых являются предовуляторные фолликулы. Стадия возбуждения начинается, как правило, с течки. На фоне и нарастания признаков течки на нее наслаиваются общая полов€uI реакция охота. течка - характеризуется набуханием и покраснением сJIизистых преддверия влагшIища, влагzшища и шейки матки. Канал шейки матки IIриоткрыт, из поповых органов выделяется слизъ. В начале течки слизь стекловидно-прозрачная, в середине она тянущаяся, к концу течки слизъ становится мутной и ryстой. Щлительностъ течки - 2-6 суток. t4 Общая половая реакция наступает через 24-зб часа после начZLJIа течки и внешне проявJIяется изменениrIми поведениrI животного, которое становится беспокойным, у него уменьшается аппетит, снижается удой, корова или телка прыгает на других самок и допускает прыжки на себя, охота - кульминационный момент стадии возбуждения. Половая охота у самок проявляется в виде готовности к спариванию. Животные стоят спокойно и допускают садку или прыжки на себя Других коров и телок. в 6070% слуrаев половая охота начинается утром и длится 12-18 часов. В конце ее происходит овуляция, ПРи которой зрелый (предовуляторный) фолликул лопается, яЙцекпетка попадает в яйцевод, где становится доступной дJuI спермиев. овуляция - процесс выделения яйцеклетки из фолликула. Происходит она у здоровых коров через 10-15 часов после окончания или через 24,з0 часов от начала охоты. вслед за овуляцией резко падает уровенъ эстрогенов в крови, что обуславливает rrереход в стадию торможения. Последняя характеризуется угасаЕиеМ признакоВ стадиИ возбуждения. ОдновременнО овуляция дает нач€шо переходу гранулезных клеток лопнувшего фолликула в лютеиновые и секреции посJIедними гормона прогестерона. Стадия уравновешивания - период относительной стабиЛЬНОСТИ физиологических процессов в половых органах самки. В этот период внутренняя среда матки обеспечивает максим€шьно р€Lзвития удобные условия ДJIя образовавшегося (если имеJIо место оплодотворение) ЗароДыШа И его имплантации. Поведение самки характеризуется индифферентным отношением к самцу. В яичникЕlх отмечается н€Llrичие хорошо рzlзвиТых желтых тел. Общая продолжителъностъ полового цикла зависит от дпителъности функционированиrI желтых тел [3]. По характеру функционаlrьного состояния яичников половой цикл делится на четыре фазы: 15 Проэструс - (перед охотой). В эту фазу имеет место быстрая . реIрессия желтого тела предыдущего цикла или предыдущей беременности. это вызывает снижение В крови концентрации гормона прогестерона, повышение чувствительности яичников к дейотвию Фсг, повышение секреции ФсГ передней долей гипофиза. Выделившийся ФсГ вызывает усиленную пролиферацию гранулезных клеток и рост антрапъных и к концу фазы фолликУлов, котОрые начИнаюТ увеличиВатъся в диаметре достигают предовуляторных р€вмеров (у коров количество таких фолликулов один, реже два). С увеличением диаметра предовуляторньж фолликулов нарастает синтез и секреция гранулезными клетками эстрогенных гормонов, которые обуславливают нарастание признаков полового возбуждения, течки и охоты. о Эструс - кульминационный период развития предовуляторного фолликула, который заканчивается его овуляцией. Овуляция у селъскохозяйственных животных происходит спонтанно, то есть независимо от встречи самки с самцом. . Метюструс - в эту фаrу на месте р€врыва предовуляторного фолликула происходит кровоизлияние в опустевшую полостъ. ВещеСТВа крови провоцируют переход гранулезных клеток в лютеиновые - они перестают синтезировать эстрогены и начинают синтезировать прогестерон, \,_ биологическ€ш роль которого состоит в поддержании беременности. Продолжителъностъ метаэструса определяется временем развития желтоГо тела до его полной функционалъной активности. В этот tIериод желтое тело нечувствителъно к лютеолитическим веществам, типа простагландина Ф2алъфа. По характеру поведения животных эта фаза совпадает со стадией уравновешивания. . Диэструс - фаза rтокоя. Характеризуется н€tпичием в яичниках максимztпьно функционирующего желтого тела, секретирующего гормон прогестерон. В эту фазу слизистая матки секретирует в полость матки вещества для питания возможного зародыша. Если зачатие не произошло, 16 клетки желтого тела Еачинают регрессироватъ, давая начаJIо новому половому циклу. ,Щиэструс совпадает со стадией уравновешивания. |.2.2. Оплодотворение и раннее р€Lзвитие эмбрионов Оплодотворение - слияние половой кJIетки самца (спермия) со полОвОй клеткой самки (яйцеклеткой) у сельскохозяйственных животных происхоДиТ в яйцеводах. ,Щля достижения яйцеклеткой зоны оплодотворения требУеТСЯ 10-45 минут. Во время rrродвижения rrо половым путям самки поJIовые кJIетки претерпевают морфологические и функционаJIъные изменения: спермий подвергается капацитации, в яйцеклетке проходит этап постовуляТоРнОГО созревания. Продолжительностъ жизни яйцеклеток после овупяции невелика - 5-6 часов. Но задолго до гибели в яйцеклетках начинается процесс постовуляторного старениrI, ведущий к нарушениям оплодотворения и развития зародышей. Процессу старения подвержены не толъко яйцеклетки, но и спермии. Оплодотворение "старой" яйцеклетки или "старым" спермием в принципе возможно, но увеличивает вероятностъ р€tзвития уродств, абортов, эмбриональной смертности. \- Вероятность заrrоздаJIого осеменения у коров невелика, так как у них овуляция происходитуже после окончания охоты. Зигота - одноклеточный организм, существование которого ограничено несколъкими часами (20-24 у коров). К концу этого срока в зиготе начинается перестройка внутреннего цитоскелета, что отражается утратой ею идеальной шарообразноЙ формы, и которая завершается дроблением внутриклеточноЙ массы на два почти равные клетки, именуемые бластомерами. Примерно через двенадцатъ часов каждый из новообразованных бластомеров делится пополам. Новообразованные четыре бластомерп, в свою ОчеРеДъ, приблизительно через такоЙ же промежуток времеци дают начЕuIо t7 i восъми бластомераru и так дЕLлее. Первые делениrI вплоть до восьмишестнадцати бластомеров rrроходит практически синхронно, затем эта синхронностъ нарушается. Развитие эмбриона до атадии восъми-шестнадцати бластомеров проходит в яицеводе, после чего зародыш опускается в матку, Маточная среда стимулирует дЕtльнейшее деление эмбриона, тогда как задержавшиеся в яЙцеводах эмбрионы часто замирают на раннеЙ стадии (так называемый 81б-ти клеточный блок р{ввития). На всем периоде развития зародыша имеются критические стадии развития, которые часто совпадают с переходом жизнедеятелъности зародыша на новый функцион€шъный уровень. Первым таким этапом следует, по-видимоМУ, считать 8-16-ти кJIеточнЫй блок, преодоление которого связано с передвижением зародыша в полость матки. На этой стадии в зародышах коров и овец происходит активизация собственного генома и нарушение ее тем или иным образом может вести в д€tлънейшем к формированию неrтолноценного зародыша или его гибели. Задержка зародыша в яйцеводе может обуславливатъся снижением реснитчатоЙ активности эпителия яЙцеводов и изменением пропускной функции истмуса. вторым критическим этапом следует считатъ момент выхода зародыша из зоны пеллюцида, когда он остается один на один с маточным окружением. ничем не защищенная бластоциста становится иммуногенной, т.е. организм может проявит на нее реакцию иммунного отторжения. она не имеет надежного контакта со слизистой оболочкой матки, а следователъно, налаженного питания. Приблизителъно с этого момента зародыш начинает гIродуцировать особый белок - фактор Тоу, который предотвращает синтез маткой простагландинов и рассасывание желтого тела. НедостаТочныЙ уровенЬ синтеза зародышем этого фактора является одной из причин ранних 18 эмбрионаJIьных потерь. Если гибель зародыша произошла на этом этапе, половой цикл животного удлиняется. третьим критическим этапом является период имплантации зародыша в слизистую маТки, при которой rIасток трофобласта под эмбриобластом рассасывается и он становится не защищенным от воздействия среды матки. наконец, четвертым критическим этапом следует считатъ BpeMrI перехода к фета-шьному периоду развития. В начале эмбрион€tлъного периода питательные вещества, необходимые для роста и р€tзвития зародышq поступают из желточного мешка. По мере роста зародыша такой уровень питания оказывается недостаточным, а плацентарная связь находится лишъ в начале становления [4]. 19 l 1.З. Искусственное осеменение В настоящее время под методом искусственного осеменения подразумев€Iют комплекс мероприятий,, совместное применение коТОРыХ обеспечивает возможность осеменения большого количества самок сгrермой избранного самца независимо от времени взятия семени и локutlrизации саМца и самки. Это обеспечивается за счет мероприятиЙ по: о рацион€Iпьному использованию репродуктивного потенциала самца; . взятию, разбавлению, дроблению на дозы, замораживанию и длительному хранению спермы самцов-производителей; \_"- о rrравилъного выявления половой охоты и своевременного введения размороженнои спермы в половые пути самки. Рациональное использование регrродуктивного материала самцовпроизводителей подр€tзумевает осуществление комплекса мероприятий, направленных на пол)ru{ение оптимЕLпьного количества качественного репродуктивного материала (спермы) за время хозяйственного исполъзования самц4 и базируется на: о обеспеченииполноценногокормлениясамцов-tIроизводителей; . соблюдении периодичности взятиlI спермы (обычно дуплетно два раза в неделю); \ . своевременной профилактике и лечении заболеваний, передающихся половым путем. В настоящее время самцов-производителей содержат на специализированных племпредприятиях, которые кроме взятия, заI\4ораживания и хранения спермы, занимаются отбором и выращиванием племенного молодняка, а также проверкой самцов на "улуqlцателъство" [18]. 2о 1.З.1. Сперма и работа с ней сперма представляет собой смесь спермиев (половых клеток) и секретоВ придаточных половых желез. Функция спермиев - оплодотворитъ яйцеклетку, функции секретов придаточных половых желез - поддержка жизнеспособности спермиев, создание необходимой кислотности во влагапище и шейке матки, частичн€ш активациrI спермиев, их способности проникнуть в яйцеклетку. решающее значение при определении дозы спермы имеет динамика полового акта. При непосредственно искусственном осеменении сперму вводят в матку или шейку матки, минуя влагаlrище, поэтому следует вводить столько спермиев, сколько их туда обычно поIIадает гIри естественном осеменении. Коровам при влага.лищном осеменении вводят | , 2 мл неразбавленной и 2 - З мл разбавленной спермы; гtри цервик€IJIъном осеменении - 0,З - 0,5 И 1 - 1,5 мл. Успех осеменения зависит также от качества спермиев. Чем акТиВнее их движение, тем менъшуIо дозу спермы можно rтрименrlть. До неДаВнеГО времени при всех способах хранеЕия спермы быков-производителей в одной дозе (1 мл) для осеменения коров и телок предусматрив€tпосъ не менее 25 млн. активных спермиев. Уменъшение концентрации сПермиев до 12,5 Млн. спермиев обусловливает снижение оплодотворяемости телок на 11,9 - 20О^" Поэтому рекомендовано государственным станциlIм по искусственному осеменению селъскохозяйственных животных исполъзовать замороженную в жидком €Lзоте сперму быков с содержанием в дозе не менее 10 млн. живых спермиев, из которых З0% должны быть с активным прямолинейно- поступательным движением. Такое количество спермиев в дозе допустимо только при использовании сrrермы с высокой оплодотворяющей способностъю. 2t У ЖИВОТных с маточным типом естественного осеменениrI сперма ПРОДВИГаеТся по просвету рогов матки к яйцепроводам. Поэтому м€Lпые дозы спермы При искусственном осеменении не дают положительных результатов. Оценка спермы по подвижности .ЩЛЯ пРоверки качества спермы необходимо использоватъ подо|ретые предметные и покровные стекла, находящиеся во время работы на ОбОГРеваеМоМ столике микроскопа. Для взятия пробы на исследование вращательными движениями сперму смешивают, приоткрывают пробку флакона и берут стерильной стеклянной палочкой иlrи пастеровской гrипеткой каплю спермы и помещают на предметное стекло. Флакон со спермой немедленно закрывают пробкой и помещают обратно в термос. даю, сперме нагреться до З8"с на обогревательном столике микроскопа. После чего при увеличеЕии микроскопа в 100-180 раз отыскивают поле зрения с наибольшей подвижностью спермиев. Подвижность спермиев оценивают по десятибалльной шкале. Высшгуrо оценкУ (10 баллов) пощ"rает сперм4 в которой практически все сшермин имеют прямолинейно-цоступательное движение. При оценке 9 баллов таких спермиев 90ОА, 8 баллов - 80, 7 баллов - 70ОА спермиев движутся прямолинейно-поступательно и т.д. замороженную сперму оценивают после оттаивания. При использовании спермы в соломинке один конец ее, закрытый специальной пробкой (стеклянный шарик и др.), отрезают стерильными ножницами и опускают во флакон с раствором 2,9О/о-НОГо лимоннокислого натрия, подогретого до 38ос. затем отрезают второй закрытый конец соломинки и оттаянную сперму выливают во флакон. Пол1..rенную смесь тщательно р€tзмешив€lют и с помощью соломинки берут каплю спермы для оценки на подвижность поД микроскопом. Из каждой партии проверяют I-2 соломинки. Пр" использовании сIIермы в облицованных |ранулах, оболочка которых выполнена из оптически прозрачного полимерного материаJIа, качество спермы оценивают перед 22 осеменением животных без предварительной разгерметизации спермодозы. Для этого, предварительно протерев стерильной салфеткой, гранулу размещают на предметном стекле и прижимают ее вторым анапогичным стеклом с помощъю специапьного зажима. Участок цранулы, расположенной между стекJIами, подводят под объектив микроскопа и определяют процент спермиев с прямолинейнопоступательным движением. В соответствии с ГоСТ 26030-s3 (Изменение J\b 1) <Сперма быков замороженн€ш> к ис11ользованию допускается сперма быков-ttроизводителей, имеющая следующие характеристики: Ч о подвижностъ спермиев, баллы (%), не ниже а (а0); о число спермиев с прямолинейно-поступательным движением (ГШД) в дозе, млн., не менее 15; . . . объем дозы, см3,0,1-1,0; выживаемость спермиев при 38оС не менее 5 часов; коли-титр отрицателъный; микроорганизмы, вызывающие инфекционные заболевания, не допускЕlются. от высокоценных быков-гtроизводителей и улучшателей, а также от быков, происходящих от родителей, признанных ул)ru{шателяМи, ДОПУСКаеТСЯ к использованию сперма с rrодвижностью для свежепол)ченной не ниже 7 балов, для рaзмороженной не ниже З бшrлов и числом спермиев с прямолинейно-поступательным движением в дозе не менее |2-t5 МЛН. спермиев в одной дозе. Хранение и оттаивание спермы. При работе с семенем (спермой) следует помнить, что на жизнеспособностъ спермиев влиrIют следующие факторы: свет - солнечные лу{и убивают спермиев, поэтому сперму надо хранитъ в темном месте, а работатъ с ней при рассеянном (неярком) дневном или искусственном свете; луIше иметь окно и электролампы с матовым zз белым стеклом. Стол, за которым работают со спермой, устанавливают вне зоны прямого освещениrI; . температУра - нагревание выше 42ОС и охлаждение до минус 1ОС огIасны для спермиев. Сперму следует хранить при установленных температурах, не допуская резкого ее охлаждения или нагреваниlI, а работу с неЙ проводитъ в лаборатории при комнатноЙ температуре; вода - ryбителъно действует на спермиев, в связи с чем сперму необходимо помещатъ в сухую, чистую, герметически закрываемуЮ ПОС}ДУ, а при хранении в тающем льДу или при появлении в термосе холодной воды упаковывать так, чтобы вода не могла проникнутъ в однодозовую гlробирку (флакон); r спирт _ вызывает гибель спермиев, поэтому инструменты и посуду после обеззараживаниJI спиртом следует обмывать 1оlо-ным стерильным раствором бикарбоната натрия или 2,9О/о-нъtМ РаСТВОРОМ лимоннокислого натрия. Запрещается хранить медикаменты и дезинфицирующие средства, не предусмотренные для использования на пунктах по осеменению животных. Куритъ в помещении, где хранят сперму, запрещается. На пункты искусственного осеменения для использования сперМУ доставляют с племпредприятия (станции по искусственному осеменению животных) и хранят одним из способов. Сперму, сохраняемую при низких темпераryрах (криоконсервация), замораживают на племпредприятиях при минус 19б'С в соломинках, необлицованных и облицованных гранулах. При работе со спермой следует соблюдать следующие rrравила: о не допускается преждевременное оттаивание спермы и повторное ее замораживание. Кратковременное повышение температуры, например при перекладывании расфасованной спермы из стационарного хранилища в транспортныЙ сосуд ,Щьюара или из одного сосуда в другоЙ, оказывает отрицательное воздействие на ее 24 качество. Що использования криоконсервированную сперму необходимо постоянно хранить в жидком €воте; .ПереДисПольЗоВаниеМоПераТорВЗаЩиТныхочкахиПерчаТках И извлекает дозу спермы (соломинку или гранулу) из сосуда ,Щьюара оттаивает, предварителъно подготовив все необходимые инструменты и оборудование для этой работы (прил. 1). Сперму, сохраняемую \ри 2-4"С (кратковременное хранение), после взятия у производителей разбавляют и постепенно охлаждают, затем отправлЯют на rтункты уIIакованные в одноразовые шробирки или амшулы (флаконы) в термосе со лъдом. При транспортировке лед должен находитъся в термосе под и над упаковкой со спермой. Полуrив термос со спермой, нужно: проверитъ количество и расположение льда, слитъ накопившуюся . воду из термоса, проконтролировать качество упаковки пробирок или ампул (флаконов), дополнить термос тающим льдом, обеспечив даJIънейшее хранение спермы при температуре не выше 4"с. Пробирки, ампулы или (ватно-марлевая слоем 1 флаконы должны быть в теплоизолирующей обертке -2 см или поролоновая) и в водонепроницаемых полиэтиленовых мешочках; о использовать сперму необходимо в течение 3 суток с момента взятия ее у быка, при этом подвижность спермиев на третьи сутки хранения должна быть не ниже 7 ба_гrлов; о перед осеменением сперму осторожно перемешать вращением пробирки, ампулы или флакона и гIроверить гIодвижность спермиев под микроскопом при температуре нагревательного столика 3 8 ОС. оттаивание спермы в соломинках. Правой рукой поднимают крышку сосуда ,щьюара и кладут рядом, а левой - поднимают пластмассовый стакан из канистры (со спермой нужного быка) до нижнего края горловины емкости. Правой рукой берут пинцет и концы его охлаждают в жидком €воте до прекращения кипения. Охлажденным пинцетом вынимают одну солОМИНКУ, быстро и энергично стряхивают остатки жидкого азота и неМеДлеННО 25 переносят в воду для оттаивания. Канистру с оставшимися соломинками о1rускают на дно сосуда, который сразу же закрывают крышкой, оттаивание спермы в соломинках проводят с использованием термостата-оттаивателя для оттаивания криоконсервированного семени, ЗатеМ соломинкУ вынимают, насу(о протирают стерилъноЙ салфеткоЙ. Одновременно оттаивают не более 2 доз при условии немедленного их исполъзОваниrI (в течение 10-15 мин). Качество спермы определяют по общепринятоЙ методике. для осеменения коров и телок спермой в соломинках применяют трубки с осеменительный инструмент, состоящий из мет€IIIлической держателем и фиксатором, стержня и защитного чехла, перед осеменением оператор берет шакет с одноразовыми пипетками, протирает тампоном, смоченным 96о-ным спиртом, один из углов пакета и надрезает его стерильными ножцицами или прорывает концом пипетки, выдвинув пипетку да 1\3 длины, соединяет ее со стерильным шприцем при помощи муфты (полиэтиленовой, резиновой) или с полиэтиленовой ампулой, 11редварителъно срезав ее колпачок. Затем он пипетку извлекает поJIностъю, а надрезанный конец ампулы запаивает. уголок мешка с защитными чехлами, обработанный спиртовым тампоном, отрезают ножницами так, чтобы из отверстия МОЖНО бЫЛО ВЗЯТЪ один чехоJI, конец которого выдвигают на 20-З0 мм, при ЭТОМ ОСТШIЪН€uI часть его остается стерильной. Левой рукой берут инструмент дJIя осеменения) а правой - соломинку с оттаянной спермой. Соломинку следует слегка встряхнутъ, держа за кончик, чтобы воздушный пузырек поднялся к пробке. Обычно встряхиВаЮТ 2 РаЗа. Поршень инструмента дJIя осеменения оттягивают примерно на 90 ММ И В трубку до упора вставляют соломинку со спермой. Конец ее оТРеЗаЮТ продезинфицированными ножницами строго перпендикулярно у самой пробки (или стеклянного шарика) после воздушного пузырька. Ножницы должны бытъ Острыми и использоватъся Толъко Для ОТРеЗаНИrI СОЛОМИНОК. zб при отрезании пробки недостаточно острыми ножницами кончик соломинки сдавливается и становится оваIIьным. В таком слrIае часть спермы при выт€LIIкивании из соломинки остается в защитном чехле. оттаивание спермы в гранулах. Гранулы бывают трех видов: необлицованные маJIого объема 0,1-0,2 мл (с высокой концентрациеи спермиев при разбавлении дозы перед осеменением изотоническим 0,5растворОм лимоннокислого натрия); необлицованные большого объема 1,0 мл (со средней концентрацией спермиев, не требующей при оттаивании разбавления дозы раствором цитрата натриrI); облицованные в полимерную оболочку объемом 0,25 мл. Для оттаивания гранул объемом 0,1-0,2 мл необходимо иметь: стеклянные стерилъные флаконы из-под пенициллина, 2,9О/о-НЪlй раствор пимоннокислого натриrI промышленного производства, расфасованного по 1 мл в ампулах вместимостъю З мл; водяную баню вместимостъЮ не меНее 1 л; мерные стеклянные пипетки на 5-10 мл (по одной); пинцет анаТОМИЧеСКИЙ длиной 25-30 см. Для оттаивания гранул объемом 0,1-0,2 мл берут \-2 амшулы или флакона с раствором лимоннокислого натрия и ставят в водяную банЮ (38"С) на 2-З мин. Быстро (за 4-5 с) подтягивают к горловине сосуда ,Щьюара канистру (со стаканом) или матерчатый мешочек с гранулами, извлекаюТ \_ стерильным и охлажденным в жидком €tзоте пинцетом нужное число их и опускают в подготовленные флаконы или амrrулы с раствором лимоннокислого натрия. Ампулы или флаконы с гранулами спермы оттаивают 8-10 с и сразу же вынимают из водяной бани, не допуская д€tльнейшего нагревания спермы, вытирают Hac)D(o полотенцем или марлевой салфеткой и ставят в штатив. У подогретой до 18-25'С спермы определяют качество. От оттаивания до введения спермы животному должно проходить не более 10-15 мин. Оттаивание гранул объемом 0,5-1,0 мл проводят без добавления раствора лимоннокислого натрия. Флакон погружают в водяную баню, 27 подогревают до температуры воды 38ос, выдерживают 2-з мин, затем в него вносят 2 гранулы замороженной спермы и дают постоять до перехода их в жидч.ю ф*у. Флакон со спермой извлекают из водяной бани, вытирают насухо наружную поверхность и оценивают качество спермы. сперму в облицованных гранулах объемом 0,25 мл оттаивают следующим образом. облицованц},ю гранулу извлекают из сосуда ,Щъюара пинцетом с широкими браншами, быстро помещают в водяную баню с температурой 38,С и оттаивают в течение В-10 с. Затем насухо протирают гранулу стерильной салфеткой и проверяют ее на герметичностЪ путеМ легкого сжатия между двумя п€tJIъцами. После этого сперму оценив€lют на подвижность. |.З.2. Выбор оптимшIъного времени осеменения независимо от способа искусственного осеменения все коровы и тёлки перед осеменением подвергаться должны гинекологической диспансеризации с целъю исключения у них физиологических оТкJIОНений, стельности и оIIределения оптимапьного срока искусственного осеменения. Коров и телок осеменяют в IIериод поповой охоты при нaшичии ТечКИ И полового возбуждения. Коровы и телки в охоте стоят спокойно и допускаЮТ на себя садку самца и прыжки ш)угих коров и телок - рефлекс (неподвижности)). Пр" искусственном осеменении выбор оптим€tпьного времени осеменения является одним из важнейших мероприятий дJuI повышения эффективности воспроизводства стада и состоит из двух этапов: выбора срока осеменения после отела и выбора оптим€шъного времени осеменения в период охоты. Для выбора оптимаlrьного времени после отела необходимо руководствоваться физиологией послеродового периода и помнить, что функция яичников восстанавливается раньше восстановления функции матки. 28 часто rrри проявлении первой охоты матка бывает еще не готова к новому плодоношению, поэтому и результативностъ первичных осеменений всегда выше при более позднИх осемеНенияХ животных на 60-90-й денъ после отела [10]. Рисунок 1. зависимостъ результативности первичных осеменений от сроков после отела. "]+ стельность в % 121и> 61_90 a -......| При выборе первого после отела осеменения не следует руководствоватъся в какую охоту (первую, вторую, третью) осеменять корову. Правило должно быть одно: осеменятъ нужно тогда, когда матка пришла в норму, буд" это первая или третья охота. Если инволюциrI матки не закончиласъ, то противопоказано осеменять в любую охоту. Выявление коров в охоте и выбор оптимаlrъного времени осеменения являются как болъшим искусством, так и наукой, требуют тщательного наблюдения за животными и знаниЙ физиологии ттолового цикла. Время искусственного осеменения коров и телок определяется следующими методами: 29 l . визуaLльно по изменениям поведенческой реакции животного, состояниrI наружных половых органов; о вагин€tпьно - с помощью стерильного влаг€Lпищного зеркaIIа осматривают влагалище и шейку матки (припухлость, качество и количество выделяемой слизи и т.д.); рект€rльно - по состоянию матки и развитию фолликулов. Матка должна бытъ ригидной, т.е. хорошо сокращающейся, на яичниках определяют наllичие фолликулов. ,Щиаметр фолликула 0,5-1 см (Ф-1) свидетельствует о начаlIе охоты, 1-1,5 см (Ф-2) - о ее середине, |,5-2 см и более (Ф-3) - конце охоты, т.е. оIIтималъном времени для осеменения. Это значит, что до овуляции ост€lлосъ 10-12 ч. Самый приемлемый метод выбора коров и телок для искусственного осеменения - групповой контакт. В такие моменты у животных отмечаются признаки половой доминанты (обнимательный рефлекс, рефлексы нацрыгивания и ((неподвижностп>). Необходим постоянный мониторинг и контролъ выявления коров и телок в охоте. Коров и телок выявляют в охоте не менее З раз в сутки: в утренние и дневные часы во время проryлок или пастьбы и вечером, до или после вечерней дойки или }дода за животными (табл. З). Снижение кратности выявления охоты до одного р€ва в денъ позволяет определить тОлько до 60% коров. У З0% коров продолжительность охоты составляет МеНее б ч, а у 2О% коров охота наблюдается в вечернее и ночное время, ПОЭТОМУ необходимо провести индивидуЕtпьное обследование таких животных. з0 Разработка базируется на трех основЕых положениях: 1. КрупныЙ рогатый скот принадлежит к животным с влагаJIищным ТиПоМосеменения'Т.е.приесТесТВеНноМПолоВоМактесперМасаМца изливается в переднюю часть влага11ища. Шейка маткц при этом, выполняет всасываюшщо функцию - своим сокраrцением она как бы втягивает сперму внутрь. Кроме того, шейка матки у крупного рогатого скота выполняет функцию 11ромежуточного сберегатеJIя спермиев. В ней создается некоторое депо спермиев, которые затем порциями rrоступают в матку, Этим определяется то, что сперма быков должна бытъ введена в переднюю часть влагаJIиЩа, каК можнО ближе к вагин€lJIьной частИ шейки матки. В одной дозе для осеменения должно быть не менее 10 млЕ. активных спермиев с поступательным движением. 2. При естественном половом акте количество спермиев, ввоДимых вО влагалище животного очень велико, в то BpeMrI как при искусственном осеменении количество спермиев в одной дозе значительно меньше. как покЕваJIи исследования, 95% спермы, поступающей при естественном половом акте, гибнет, и толъко 5о/о погrадет в шейку и сохраняет там свою жизнес11особность. Следовательно, при искусственном осеменении вся доза должна быть введена непосредственно в шеЙку матки. з. Стенки влагЕLлищ рожавших коров вследствие их растяжения при беременности образуют складки, или кармашки, что требует необходимости точного знания локшIизации влагаlrищного отверстия шеЙКИ МаТКИ ПРИ искусственном осеменении. Эти три фактора определяют существование четырех способОВ искусственного осеменениrI крупного рогатого скота. з1 1.4.1. Эпицервикальный способ осеменения название способ пол)цил по греческим словам "эпи" - около и ''цервикс" - шейка. Иными словами - введение спермы как можно ближе к кан€rлу шейки матки. Таким образом, при таком способе осеменениrI частично имитируется естественный способ, при котором сперма изливается как можно ближе к влагалищному отверстию канаlrа шейки матки. Используется только при осеменении телок. возможность применения этого способа обусловлена отсутствием у телок растягиваний (кармашек) влагЕLлища. Это оrrределяет То, что при глубоком введении катетера кончик его почти совпадает с влагалищным отверстием шейки матки. В этом случае вводимая сперма изливается на влагалищное отверстие шейки матки и, при стимуляции ее всасывающей функциИ путеМ легкого массажа клитора, попадает в канап шейки матки [12]. В набор инструментов входят: стерилъная полиэтиленовая ампула дJUI спермЫ или плаСтмассовый шприц, стерильный гrолистироловый катетер З540 см. В одной дозе для осеменения должно бытъ не менее 10 млн. активных спермиев с поступатеJIьным движением. Техника осеменениrI: 1. Животное фиксируют. 2. Подготавливают инструменты. .Щля этого полиэтиленовую ампУЛУ присоединяют к катетеру. З. Проводят размораживание и оценку спермы по определенной методике. 4. Затем ампулу сдавливают для удаления из нее воздуха и засасывают порцию заморожеЕно-отт€шнного или свежеразбавленного семени. 5. После тщательного Ty€lJIeTa наружных половых органов телки катетер вводят в преддверие влагалища и прот€tлкивают катетер приблизителъно на половину его длины под углом приблизителъно 20-30 градусов вверх от линии позвоночника. з2 6. После этого направление движения катетера ориентируют в направлении приблизительно 20-30 градусов вниз от линии позвоночника. Катетер продвигают до упора, содержимое ампулы выдавливают. Ампулу отсоединяют и делают легкий массаж клитора, наблюдая виЗУ€LльнО За продвижением спермы по катетеру. 7. Осторожно вытягивают катетер. После осеменения обесrrечивают спокойные условия для животного. Недостаток способа: применяется толъко для телок. Показателъ оплодотворяемости телок - около 60-70 %. l .4.2. Маноцервик€tльный способ осеменения Название способ полу{ил по греческим словам: "мано" - рука и "цервикс" - шейка. Иными словами - осеменение в канагI шеЙки матки с одновременным контролем локаlrизации влагаJIищного отверстия шейки матки рукой. Применяется толъко для осеменения коров [15]. В набор инструментов входят: стерильная полиэтиленовая амrrула дJuI спермы, стерилъный катетер (10 см), полиэтиленовая или резиноваrI перчатка. техника способа: 1. Животное фиксируют. 2. Подготавливают инструменты. ,Щля этого полиэтиленовую ампулу присоединяют к катетеру. З. Проводят рЕ}змораживание и оценку спермы по определенной методике. 4. Затем ампулу сдавливают для удаJIения из нее воздуха и засасывают порцию замороженно-отт€uIнного или свежеразбавленного семени. 5. После тщателъЕого TyutJIeTa наружных половых органов коровы на руку одевают перчатку, омывают ее стерильным физиологическим раствором ИЛИ 2,9o/ojнblM РаСТВОРОМ ЦИТРаТа НаТРИЯ , ОСТОРОЖНО ВВОДЯТ РУКУ ВО ВЛаг€rпище проверяют состояние и делают легкий масс€lж зз шейки матки. Затем другой рукой подают заряженную порцией спермы ампулу с катетером и под контролем ук€вательного п€tпьца подталкивают катетер до тех пор, пока он не булет введен в шейку на глубину 5-6 см. Затем выдавливают содержимое ампулы. 6. Осторожно вытягивают руку и 1-2 минуты делают легкий массаж клитора для стимуляции всасывающей функции шейки. На последнее обстоятелъство следует обратитъ особое внимание, так как легкий массаж клитора способствует не толъко сокращению шейки матки, но и стимулирУеТ выход (овуляцию) яйцеклетки, уменьшая, таким образом, вероятностъ задержки овуляции и яловостъ. Недостаток способа: невозможность использованиrI для осеменения животных с узким влагалищем. Показателъ оrrлодотворяемости - 65-70 %. |.4.З . Визоцервикаrrьный способ осеменения Способ пол)чил н€ввание по греческим словам: "визо" - смотрю и "цервикс" - шейка. Иными словами - осеменение с визу€LJIьным лок€}лизации контролем шейки матки [9]. техника способа: 1. Животное фиксируют. 2. Инструменты готовят в лаборатории пункта, где на стоJIе располагают пронумерованные стеклянные банки емкостью 100 мл с притертыми крышками. В банки 1, З и 4 наливают свежеприготовленный стерильный раствор 2,9Yо-ного лимоннокислого натрия (цитрата натрия), в банкУ 2 - 70О/о-ный спирт; раствор в банках З и 4 должен быть теплым (ЗS-40 градусов), чтобы шприц нагревался перед наполнением его спермой. шприц обрабатывают отмыванием раствором из банки 1, затем ОбеЗЗаРажиВают спиртом из банки 2, затем промывают растворами из банок 3 и4, з4 3. Набрав порцию замороженно-оттаянного или свежеразбавленного семени в шцриц, его держат вертикаJIьно, катетером вверх, Влагалищное теплым 1ой-ным раствором хлорида натрия или пищевой зеркurпо увлажняют соды, затем вводят его во влагалище, предварителъно раскрыв половые ryбы в сторону, После рукой. При введении во влагЕUIище зерк€tло держат ру{ками введения ручки зеркала поворачивают вниз. Осторожно раскрывают зерк€шо и, отыскав отверстие шейки матки, вводят в него шприц-катетер на глубину 5-6 см. Медпенно, нажимая на поршенъ шприца, выдавливают сперму, 4. После этого шIIриц-катетер, а затем и зеркаJIо осторожно извлекают. при осеменении нескольких коров спермой одного быка наружную поверхность катетера после каждого животного обязателъно дезинфицируют спиртовым тампоном. влагалищное зерк€lJIо после осеменениrI каждой коровы моют теtIлым 2-ЗYо-нътм раствором пищевой соды, вытирают насухо и протирают. Если есть возможность, зеркаJIо прожаривают в жаровом шкафу. 5. При осеменении животных с шомощью влагалиIцного зеркаlrа с продольным вырезом катетер шприца rrосле введения его в канаII шейки матки слегка прижимают к верхнему своду влагалищо и, придерживая шшриц другой рукой, осторожно извлекают зерк€lJIо из влагЕLлища. Через 20-30 с. после того, как животное успокоится, плавным нажатием на поршенъ вводят сперму в шейку матки и вынимают шприц из половых путей самки. Недостаток способа: возможностъ нанесения травм стенкам ВлаГаJIиЩа при неосторожных манипуляциях с зеркаIIом. Показатель оплодотворяемости - 50-60 %. | .4.4. Ректоцервикапьный способ осеменения Способ rrол)чил назваIIие по греческим словам: 'lpeKTa" - прямая кишка и "цервикс" - шейка. Иными словами - осеменение с контролsм локапизации шейки матки через прямую кишку. Наилуrший сгrособ осеменения, так как з5 при этом обеспечивается точЕое введение спермы в канап шейки матки, а также одновременный массаж половых органов животного [19]. В набор инструментов входят: стерильная полиэтиленовая ампула дJUI спермы или пJIастмассовый шприц, стерильный полистироловый катетер 3540 см с полиэтиленовым чехлом, полиэтиленовая перчатка. техника способа: 1. Животное фиксируют. 2. Подготавливают инструменты. ,щля этого полиэтиленовую ампулу или шприц присоединяют к катетеру. З. Проводят р€вмораживание и оценку спермы по определенной методике. Затем ампулу сдавливают для уд€Lления из нее воздуха и засасывают порцию замороженно-оттаяного или свежеразбавленного семени. 4. После тщателъного туалета наружных половых органов коровы на руку одевают перчатку, омывают ее стерильным физиологическим раствором или 2,9уо-ным раствором цитрата натрия. Щругой рукой р€вдвигают половые ryбы и вводят катетер во влагЕLпище. Во избежание попадания в отВерстИе мочеисшускателъного канапа катетер снач€Lпа IIродвигают снизу Вверх И вперед, д€rлее горизонт€tlrьно до упора в шейку матки. Ру*у в перчатке вводяТ в прямую кишку, фиксируют шейку матки между ук€rзателъным и среДниМ пальцами. Большим п€tльцем прощупывают отверстие канаJIа шейки и вводят туда катетер. Некоторую трудностъ представляет фиксация отверстиrI шейки из-за ее несколько болъшего диаметра по сравнению с диаметром самой шейки. Чтобы преодолетъ это можно, ухватив шейку, слегка подтянутъ ее на себя. 5. Повторив эту гrроцедуру 2-З рв0, добиваются расслабления шейки и возможности з€жвата вJIагалищного отверстия шейки путем последователъных перехватов ее по длине. При попадании катетера в канЕIп шейки матки вращательными движениями шейку натягивают на катетер. Катетер продвигают в шейку насколько возможно глубже. Наилуrшим зб приемом есть прохождение катетером всей шейки и выдавливание спермы в полость теламатки. 6. После этого руку осторожно извлекают из прямой кишки. От ] катетера отсоединяют шприц или ампулу. 7.ЗaтемкaTеTepHaЧинaюToсTopoжнoИМеДленнoBЬITяГиBaTЬ' сопровождаlI эту процедуру легким массажем клитора. Визуально наблюдают всасывание остатков спермы из катетера, что являеТся подтверждением наличия всасываюrцей функции шейки. 8. Поспе извлечения катетера массаж клитора продолжают еще |-2 минуты. После осеменения животному обеспечивают покой. Недостаток способа: необходимость высокой квалификации оцератора. Вероятность травм канапа шейки при неосторожных манипуляциях катетером. Показателъ оплодотворяемости - около 70-75 ОА. з7 , 2. Собственное исследование 2.1. Регистрация и анамнез животного Регистрация. Вид животного: КРС Кличка: Буренка Пол: Корова Масть: Красно-белая Возраст: 2 года Порода: Симентальская Владелец животного: СПК <Байкальский>> Подробный адрес владелъца: Республика Бурятия, Кабанский раЙОн, село Кабанск, улица Кирова, 10. Anamnesis vitae. Кормление трехразовое, согласно следуюrцему рациону. Корма Количество (кг). Силос вико- 12 овсяный Са Р Каротин 0,2з 24 1,9 0,9 20 К.ед П.П (кг). (г). корма 0,J 1,1 227 1,5 4,t 1 сено злаковое 8 0,5 з7 5.4 1 ,1 \4 Всего. 20,,/ 1,8з 288 8,8 6,1 35 Конц. з8 J,з Норма. 26 45 620 250 -215 К норме 5.41 з6,2 JJл!. Поение. Коров поят водошроводной водой, ln,n без примесей, без посторонних запЕlхов, чистая, без осадка, количество воды в сутки - поят в волю, поение индивидуаIIъное, перерыв в подаче воды составляет не более З часов. Содержание. Животное содержится в тиIIовом коровнике, рассчитанном на 200 скотомест. Содержание коров привязное. КОРОВНИК четырехрядный, полы в проходах цементированные, в стойлах деревянныЙ, подстилка из сена, кормушки бетонированные. Вентиляция вытяжная, наВОЗ убирается скребковым транспортёром, освещённость естественная, а В тёмное время - электрическая, недостаточная. Назначение животного для пол)чения молока и IIриплода. з9 2.2. Проведение осеменениrI Осеменение проводилось ректоцервик€Lльным споообом. ОСУЩеСтВляеТся исследованием путем п€IJIъпации ЯИЧНИКОВl РОГОВ, Тела и шеЙки матки, маточных брыжеек через прямую кишку и проходящих по ним маточных артерий, плода. .Щля начала была проведена фиксация животного и туЕrлет наружных ПОЛОВЫХ ОРГаНОВ. На левую руку надеваJIи полиэтиленовую перчатку и ОРОШ€lЛИ ее ВОдОЙ. После подготовки руки левоЙ рукоЙ хвост брала хвост, его И отводила В сторону. Подготовленную руку со сложенными В виде конуса паJIьцами вращателъным движением вводила в приподним€LIIа прямую кишку (гrрил. 2). Кисть руки, введенная в анус, сначала попадает в ампуловидное расширение прямой кишки. Стенка кишки в этом месте плотная и неподвижная, что делает почти невозможным п€lльпацию органов. ПоэтомУ рукУ потребоваJIосЬ ввести глубже. Пр" половых этоМ рука натЕUIкивается на суженную часть кишки. Необходимо осторожно, вначаJIе п€шIьцы, а затем и кисть руки ввести в это сужение. В этот момент моryт быть силъные сокращения кишечника, сдавливающие и вытаJIкивающие сокращение не следует преодолевать силой, рывком. Нужно удержатъ руку. руку в том же положении, в каком она была, и дождаться, когда кишечник несколъко расслабится. руку вместе с <<надетой>> на нее суженной частью кишки, отвела немного назад и приступила к пutльпации органов, лежащих в тазовой полости. Смещая руку вместе с кишкой вправо, влево, вперед, назад, пропальпировапа дно т€}за, боковые стенки тазовой полости, нижний край входа в т€lз. Так как матка и яичники подвешеЕы на брыжейке, то местоположение их, даже в небеременном состоянии, непостоянно. Яичники прощупЫвЕlютсЯ в виде округлыХ или продолговатых плотных образований, величиной от фасоли до куриного яйца. они легко смещаются в любую сторону. Шейка матки пропryпывается в виде плотного в€UIика, лежащего вдоль тазовой полости, и может смещаться вправо и влево от 40 средней линии. при исследовании яичников, рогов, тела и шейки матки обрашала внимание на величину, формУ, консистенцию и местоположение этих органов, У бесплодноЙ коровы при ректаJIъном исследовании шеЙкq тело,рога матки и яичники расположены в т€rзовой полости (у животных, много рожавших, старых, матка может опускатъся в брюшную полостъ и при отсутствии стелъноСти). ПрИ [€lJIьпацИи маткИ прощуrrывается межроговая борозда и симметрично расположенные, равной величины, одинаковой формы и консистенции, рога матки. Матку можЕо ощутить в виде полушаровидного гладкого образования, разделенного на две симметричные половины межроговоЙ бороздоЙ и бифуркациеЙ. ,щалее ввела пипетку до упора в свод влагапища и удерживаJIи правой рукой (прил. 3). Убедившись, что инструмент поп€ш ее в отверстие канаJIа шейки матки, захватила шейку всей ладонъю, 11риподнимая над дном тчва и осторожными движениями надвигает её на пипетку или шприц Контролируя паJIьцами положение инструментц продвигаJIа его в шейку матки на гпубину 6-8 см. медленно надавливая на шоршень, ввела сперму, одновременно сJIегка отодвигая назад (на несколько миллиметров) кончик инструмента к шейке матки для полного выт€lJIкивания после спермы из инструмента (прил. 4). введения спермы медленно извлекла из влагапища осеменительный инструмент, провела легкий массаж шейки матки и вывела руку из прямой кишки, дополнительно воздействуют на другие эрогенные зоны коровы. 41, ЗАКЛЮЧЕНИЕ Метод искусственного осеменения нашёл широкое применеНие В скотоводстве. Успешная разработка методов замораживания семени быка даёт возможность для долгосрочного сохранения семени и применениrI искусственного осеменениrI во мЕогих странах мира. ЗамороженЕОе ceMll может быть сохранено в течение несколъких лет, а возможно, в ТечеНИе неопределенно длительного срока. Искусственное осеменение имеет громадное зЕачение для наиболее широкого использованиrI ценных быков. Эффективностъ искусственНогО осеменениrI самок животных в значительной мере зависит от своевременноГо введеЕия сrrермы. Причиной низкой оплодотворяемости часто бывает неумение выбрать время, наилу{шее дJIя осеменения. Правильная организациrI искусственного осеменения, строго базирlтощаяся на физиологических особенностях организма животных, способствует ул)чшению породного состава скота и повышению его продуктивности. Методом естественного осеменения можно в течение года поJý/читъ от одного быка 40-80 телят. При искусственном осеменении спермой этих же производителей в течение одного сезона можно полlпrить от одного быка более 20 тыс. телят. Вот почему искусственЕое осеменение является важным мероприятием, направленным на самое широкое использование ценых производителей, способных повысить молочную и мясную виды продуктивности животных. Искусственное осеменение позволяет в короткий срок из)л{итъ производителя, поJýтIить от него огромное количество приплода и путём отбора усилить и закрегIить полезные качества животных, оформить породную группу, а затем ttороду. При искусственном осеменении производителъ не имеет контакта с маточным поголовьем. Сперму можно пол)цить без самки - на ч1..rело. Эта 42 особенность метода осеменения, имеет огромное практическое значение в хозяйствах, неблагополуIным по некоторым инфекционным и инвuвионным заболеванием, вызывающим симптоматическое бесплодие. Но искусственное как луIший и универс€tльный метод осеменение нельзя расцениватъ профилактики и терапии всех форпл бесплодия, ибо он Ее замен,Iет ни кормов, ни помещений, ни Ряда Других мероприятий бесплодия. 43 профилактики СПИСОК ИСПОJЪЗУЕМОЙ JIИТЕРАТУРЫ 1. Дкушерство, гинекология и биотехника размножения животных: методические указаниrI дJuI студентов Iv курса факультета ветеринарной медицины / Сост. в. с. Двдеенко, в. г. Гавриш, д.м, Семиволос; ФГОУ впО "Саратовский гАу". Саратов, 2002, - 100 с,; 2. Биология воспроизведения и искусственное осеменение селъскохозяйственных животных: Сборник статей / Сост.: акад. в. к, Милованов. -.Щубровицы : Отд. НЩrч.-r"*". информации, |966. - 1В5 с.; Ветеринарное акушерство и гинекология / А. п. Студенцов, В, С, з. Шипилов, л. г. Субботин?, о. Н. Преображенский; Под ред.В. С. Шипилова. - 6-е ИЗД., испр. и доп. М.: Агропромиздат, 1986, - 480 с,; 4. Ветеринарное акушерство, гинекология и биотехника В. Я. Еfuкитин и др.: Под р€tзмножения / А. п. СтуленцоВ, В. С. Шипилов, ред. В. Я. Никитина и м. г. Миролюбова. 7-е изд., перераб. и доп, М, : Колос, 1999. - 495 с.; 5. Ветеринарное акушерство, гинекология и биотехника специаIIъностям рzвмножения : Учеб. для студентов вузов, обучающихся тrо "Ветеринария" и "Зоотехния" / [А. П. Студенцов, В. С. Шипилов, В. Я. Никитин и др.]; Под ред. В. Я. Никитино, М. Г. Миролюбова. - 7 _ изд., перераб. и доп. - Москва : Колос, 2000. - 49З, с.; 6. и. д. Бочаров, А.в. Бесхлебнов. Акушерство, гинекологиrI И искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. ЛенинграД "Колос" , t967.; 7. Министерство сельского хозяйства РоссийскоЙ ФедеРаЦИИ, ,Щепартамент животноводства и племенного дела. "ИскУССТВеННОе осеменение коров и телок. Инотрукция."; 8. Министерство селъского хозяйства российской федерации. ОАО "Головной центр по восIIроизводству сельскохозяйственных жиВоТНЫХ". Пособие по искусственному. Осеменению коров и телок. Москва ФГБFry "Росинформагротех. 20 |2; 44 Практикум по акушерству, гинекологии и искусственному осеменению сельскохозяйственных животных / В. С. ШиПИЛОВ И ДР. М. 9. : Агропромиздат, 1988. З35 с.; 10. Практикум осеменению искусственному IIо сельскохозяйственных животных : [По специалъности "Зоотехния"f l и. Ф. Заянчковский, и. в. Смирнов. - Москва : Колос, \975. - 27I с.; 11. Искусственное осеменение животных [Электронный ресурс] Режим доступа : http //www. zdrav-korm. ru/statya- 4 (Щата обращения : 06.0a.202t); |2. Искусственное осеменение хtивотных животных: способы, техники Режим [Электронный доступа: https://fb.ru/article/463661/iskusstvennoe-oSemenenie-jivotnyih-sposobyi-tehniki- rezultatyi (Щата обратт\ения 09.04.202I); 1З. Искусственное осеменение КРС [Электронный ресурс] _ Режим доступа: htфs://fermer.blog/bok/zhivotnye/krupnyy-rogatyy-skot-krs/razvedeniekrs/864-iskusstvennoe-osemenenie-korov-i-telok.htm1 (Дата обращения 09.04.2021); |4. Искусственное осеменение крупного рогатого скота [Электронный ресурс] - Режим досryпа: https://agrovesti.netl|TbltechlcattletecЫiskusstvelmoe-osemenenie-krupnogo-rogatogo-skota.htm1 (Щата обращения 11.04.2021); 15. Искусственное осеменение сеJIьскохозяЙственных животных учеб. пособие / М. В. Назаров, Е. А. Горпинченко, Б. В. Гаврилов. - : Краснодар : КубГАУ,201'8. - 138 с.; 16. Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных [Электронный ресурс] - Режим доступа: https://veterinary.academic.ru/ (Щата обращения 0б.04. 202|); |7. Правила и техники искусственного осеменения коров [Электронный - ресурс] 45 Режим доступа: https://ferma.experYjivotnieЛ<rs/razvedenie/isskustvennoe-osemenenie-korov/ (,Щата обращения 1 3.04. 202|); 18. Преимущества и методы искусственного осеменениrI короВ - ресурс] [Электронный Режим доступа: https://oselhoze.ru/zhivotnovodstvo/korovy/iskusstvennoe-osemenenie-korov (.Щата обращения 1 З.04.202I); 19. Техники искусственного осеменениrI коров [Электронный ресУрс] - Режим доступа: https://fermers.ru/veterinariya/krs/iskusstvennoe-osemenenie (Щата обращения |2.04.202|). 46 приложЕtмя Приложение 1. Хранение спермы в сосуде ,Щъюара. 47 Приложенпе 2. Ректальное исследовацие. !WЁ ;;iýз"А #*аg ; l' 48 Приложение 3. Ввод пипетки в свод вл€}гаJIища. 49 Приложение 4. Методtтка ректоцервикапьного способа осеменениrI. OcerterreHIIe коров (пOcotlolI F е кто цег BI lK.1.-I ь ны \I ( rt'r1.1 Jl11(}l-"1,_1e}{ '''' l ""'^"l "'""' lr t) ]а {} Ii ('rell;t 1.1\B.1 f.1 u:eTllill }i.i1-Ir}I I]\,lroll ( ilr]tll l](),1e}r r)-IBelltTI!il IIlt,l-tItL \!.l I Ir1I Il IiOHlltl rII1ItelIill }IItliIIlile1' ,Il.iIi.I\_ { Ii()('t};lll}J itr Irгr t I }l(,i{IIi]l {'l (1\ t,}it,lit.IljLlI EBeýeKтre осеменIIтельноrо l.t}r{Tpyмelrтa в ýередЕюю чrетъ шеriкll }taTI(T,l 50